[发明专利]4’,7-二氧乙酰-APAK-异黄酮，其合成,活性和应用

说明书

本发明公开了4’,7‑二氧乙酰‑Ala‑Pro‑Ala‑Lys‑异黄酮,公开了它的制备方法,公开了它的抗血栓活性，公开了它的溶血栓活性，公开了它的治疗脑血栓活性，公开了它的清除自由基活性，因而本发明公开了它在制备抗血栓药物，溶血栓药物，治疗脑血栓药物和清除自由基药物中的应用。

技术领域

本发明涉及4’,7-二氧乙酰-Ala-Pro-Ala-Lys-异黄酮,涉及它的制备方法，涉及它的抗血栓活性及涉及它的溶血栓活性，涉及它的治疗脑血栓活性，涉及它清除自由基活性，因而本发明涉及它作为抗血栓药物，溶血栓药物，治疗脑血栓药物和清除自由基药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

背景技术

缺血性中风是一类较常见且危害严重的脑血管疾病，特点是发病率高、病死率高、致残率高和复发率高。目前临床治疗缺血性中风面临没有有效药物的现实，尤其中风面4h以上的患者非死即残。发明对中风面4小时以上的患者有效的药物是临床的重要需求。本发明设定的基本目标之一就是为缺血性中风发明新型化合物，突破缺血性中风4小时黄金治疗时间窗口，帮助缺血性中风的临床治疗走出困境。为了达到这个目标，发明人经历了艰苦的发明过程。发明人的第一个发明是涉及P6A相关的溶血栓化合物，它们大约于1996年获得国家专利授权。因为溶血栓活性不等于治疗缺血性中风活性，所以这个专利中与P6A相关的溶血栓化合物没有评价出治疗缺血性中风功能。发明人的第二个发明涉及RGD-四肽与P6A相关的溶血栓化合物缀合形成抗血栓化合物。尽管在2.5μmol/kg剂量下RGDF具有抗血栓活性，但是在2.5μmol/kg剂量下P6A-RGDF和QP6A-RGDF却没有抗血栓活性。尽管在5μmol/kg剂量下没有抗血栓活性的RGDS和RGDV与P6A和QP6A的缀合物P6A-RGDS、P6A-RGDV、QP6A-RGDS和QP6A-RGDV在2.5μmol/kg剂量下却有抗血栓活性。尽管10μmol/kg P6A和QP6A都有溶血栓活性，但是P6A-RGDF、QP6A-RGDF、P6A-RGDS、P6A-RGDV、QP6A-RGDS和QP6A-RGDV实质上都没有溶血栓活性。可见，药效团组合并不是总能导致期望的发明。发明人的第三个发明是将PAK序列(ARPAK、GRPAK、QRPAK)与1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉缀合，创造具有清除自由基和溶血栓双重功能的缀合物。在10μmol/kg剂量下1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-ARPAK、1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-GRPAK和1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-QRPAK显示溶血栓活性。它们的活性明显低于剂量为20000IU/kg的UK的溶血栓活性，并只与ARPAK、GRPAK和QRPAK的活性相当。1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-ARPAK、1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-GRPAK和1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-QRPAK在ESR仪(即顺磁共振仪)上可以测到清除O·自由基、·OH自由基和NO·自由基活性，但是在国际公认的评价模型(对乙酰胆碱舒张的大鼠主动脉条的抑制实验)上它们不能拮抗乙酰胆碱诱导的大鼠主动脉条舒张。1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-ARPAK、1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-GRPAK和1,3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-QRPAK最不理想的性质是没有治疗缺血性中风的作用。发明人曾经公开式II的咪唑啉化合物在中风面24h的大鼠缺血性中风模型上，显示优秀疗效。即连续静脉注射6天式II的咪唑啉化合物，每天1次，首次剂量为5μmol/kg，后5次的剂量为2μmol/kg具有优秀疗效。式中aa₁和aa₂可为同时存在,aa₁存在但aa₂不存在,或同时不存在；当aa₁和aa₂同时存在时,aa₁为R(Arg),且aa₂为G(Gly),A(Ala)或Q(Gln)；当aa₁存在但aa₂不存在时,aa₁为R(Arg)；aa₃可为S(Ser),V(Val)或F(Phe)。由于式II的咪唑啉化合物的2-位是4-氧乙酰-Lys。而该Lys的侧链氨基和主链羧基分别与RGD抗血栓四肽及ARPAK溶栓肽相连接,所以结构比较复杂需要简化。