[发明专利]一种乙氧喹啉产品中对氨基苯乙醚杂质含量的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效抗氧化剂纯度及其中杂质含量的分析方法，具体地说是一种乙氧基喹啉产品纯度及其中对氨基苯乙醚杂质含量的高效液相色谱分析方法。

背景技术

乙氧喹啉(ethoxyquin)，化学名为6-乙氧基-2,2,4-三甲基-1,2二氢喹啉，化学结构式如下式(I)：

饲料中的维生素A、D、E、K、胡萝卜素和脂肪酸、鱼粉、肉粉、骨粉、血粉、羽毛粉等主要营养成分在饲料的生产、运输和贮存过程中极易被氧化而影响饲料的食效及安全性能，因此必须添加抗氧化剂。各种抗氧化剂中，乙氧基喹啉是公认最有效、最经济实用的一种饲料抗氧化剂。

乙氧喹啉一般可通过对氨基苯乙醚(p-phenetidine)与丙酮在催化剂作用下进行缩合反应生产得到，其反应方程式如下式(II)：

从反应方程式上看，产品中主要可能出现的杂质来源于未转化的反应物丙酮、对氨基苯乙醚和副产物水，其中丙酮与水沸点较低，可通过蒸馏的方法脱除。对氨基苯乙醚和乙氧喹啉沸点均较高，往往会在蒸馏过程中一并带出，故乙氧喹啉产品中常含有少量(～0.5wt.％)至微量(数十mg/L)的对氨基苯乙醚组分残留。因此，准确测定乙氧喹啉产品纯度及其中对氨基苯乙醚杂质含量对完整分析乙氧喹啉产品性质具有重要意义。

目前文献和检测标准主要涉及了利用高效液相色谱对各类农产品、饲料等产品中微量乙氧喹啉产品残留浓度进行的分析，如中华人民共和国国家进出口商品检验局(SN 0287-93进出口水果中乙氧喹残留量检验方法-液相色谱法[S].北京：中国标准出版社，1993)，以及PingHe和Robert G Ackman(J.Sci.Food Agric,80,1,10–16,2000)有关鱼饲料中的乙氧喹含量检验方法。关于利用高效液相色谱法对乙氧喹啉产品中对氨基苯乙醚杂质含量分析方法目前还没有相关的专利或文献报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种针对乙氧喹啉产品纯度检测及产品中低浓度或超低浓度对氨基苯乙醚杂质含量的高效液相色谱检测分析方法，具有分析结果准确、分析效率高、样品处理简单的优点。

为实现上述发明目的，本发明提供了一种乙氧喹啉产品纯度检测及产品中低浓度或超低浓度对氨基苯乙醚杂质含量的高效液相色谱分析方法，通过以下步骤来实现：

分别称取纯乙氧喹啉和对氨基苯乙醚，置于50mL容量瓶中，用有机溶剂溶解后定容，超声过滤后配制成分别含乙氧喹啉和对氨基苯乙醚0.1～1000mg/L的标准样品溶液待测；

将标准样品溶液通入色谱柱中，采用反向液相色谱外标百分比法定量分析，所述液相色谱条件为：

柱温设置在20～50℃，流速：1～2mL/min，用有机溶剂乙腈和水的混合液作流动相，流动相体积比为CH₃CN:H₂O在50％:50％至90％:10％，进样量2～100μL，用紫外检测器对乙氧喹啉及其杂质对氨基苯乙醚进行高效液相色谱分析，检测波长在210～270nm。

所述的有机溶剂是液相色谱级乙腈和高纯去离子水。

所述的高效液相色谱柱是10mm×150mm 10μm半制备级C18柱。

所述的紫外检测器是DAD紫外检测器。

在上述技术方案基础上，检测波长为210～270nm内调整，通过分析两者的紫外吸收信号值，可以发现两者分别在238nm(对氨基苯乙醚)和229nm(乙氧喹啉)有较好的响应，因为对氨基苯乙醚是微量杂质组分，优选238nm作为检测波长。

在上述技术方案基础上，调整流动相流速和乙腈与水的比例，一般认为，分离因子大于2时可实现较好的分离，通过综合分离时间、分离效果和乙腈消耗量分析，可选用流动相流速1mL/min，乙腈含量为80％可实现较好的分离效果，较为节约时间且所需乙腈溶剂量也较少。由此开展下一步的各种不同进样条件下的分离情况测试，具体见表1。

表1乙氧喹啉与对氨基苯乙醚色谱分离参数结果

所述的对氨基苯乙醚在色谱柱上的保留时间为9.45min，乙氧喹啉的保留时间是18.48min。

在上述技术方案基础上，调整进样量在2～100μL，针对5mg/L以下的低浓度样品中对氨基苯乙醚成分检测，优选100μL，针对对氨基苯乙醚浓度在10mg/L以上的样品，选用20μL，针对500mg/L以上高浓度对氨基苯乙醚成分检测，选用5μL。多次检测数据标准偏差小于5％。