[发明专利]用于前列腺癌诊断的miRNA生物标志物及检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测，具体涉及用于人前列腺癌诊断的microRNA生物标志物及检测试 剂盒。

背景技术

前列腺癌发病率在西方国家位于男性恶性肿瘤首位，其死亡率居各种癌症的第二位，仅 次于肺癌。近年来，我国前列腺癌发病率呈现逐年上升的趋势。目前前列腺癌诊断及随访主 要采取尿细胞学检查与前列腺镜检相结合的方法，不仅费用昂贵，同时为患者带来较大的痛 苦，而且存在感染、出血的风险。采用PSA及DRE等检测手段均难以有效地从良性病变中 区分出前列腺癌患者，导致过度前列腺穿刺活检，给患者带来极大痛苦及精神和经济负担。

MicroRNA(miRNA)是最新发现的长约18-25个核苷酸的非编码小分子RNA，在进化 上高度保守，数量约占基因组的1％，现已普遍认为miRNA与人类疾病的发生有密切的联系， 其发现为人们在基因水平认识癌症提供了新思路。MiRNA在转录或转录后水平负调控蛋白质 编码基因的表达：通过与其靶基因mRNA非完全互补或近似完全互补结合，导致mRNA降 解或抑制其翻译。人类基因组约30％的基因受miRNA调控，在细胞的生长、增殖、分化和 凋亡等多方面发挥着重要的生物调节作用。研究已证实miRNA的异常调控与肿瘤形成及进 展关系密切。MiRNA的靶基因多数是参与转录、信号转导、肿瘤发生等生物学效应的基因。 随着miRNA与癌症关系的不断深入研究，发现miRNA并不只是参与了癌症形成的初期阶段， 还涉及到疾病病情变化、对药物的敏感性、患者预后等等多方面。随后基于miRNA的癌症 基因治疗顺势登上舞台，凸显出很大的研究价值。

随着对前列腺癌相关miRNA的研究，发现许多miRNA的变化与前列腺癌发生、发展有 关。目前已报道了在不同组织中miRNA比mRNA携带的信息量更大，也更具有预测价值。

发明内容

本发明的目的在于提供用于前列腺癌诊断的microRNA生物标志物及检测试剂盒。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

用于人前列腺癌诊断的microRNA生物标志物，包括：hsa-miR-384、hsa-miR-100-5p、 hsa-miR-424-5p、hsa-miR-155-5p和hsa-miR-224-5p；所述hsa-miR-384的核苷酸序列如 SEQIDNO.1所示；所述hsa-miR-100-5p的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述 hsa-miR-424-5p的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述hsa-miR-155-5p的核苷酸序列如 SEQIDNO.4所示；所述hsa-miR-224-5p的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。

进一步地，所述microRNA生物标志物为人血清microRNA生物标志物。

一组人前列腺癌诊断用microRNA引物、探针的组合，包括hsa-miR-384引物、探针， hsa-miR-100-5p引物、探针，hsa-miR-424-5p引物、探针，hsa-miR-155-5p引物、探针， hsa-miR-224-5p引物、探针；所述引物包括反转录引物、定量PCR前引物和定量PCR后引物； hsa-miR-384的反转录引物序列如SEQIDNO.6所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.7 所示，定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所示；hsa-miR-100-5p的反转录引物序列如 SEQIDNO.8所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.9所示，定量PCR后引物序列如 SEQIDNO.16所示；hsa-miR-424-5p的反转录引物序列如SEQIDNO.10所示，定量PCR前 引物序列如SEQIDNO.11所示，定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所示；hsa-miR-155-5p 的反转录引物序列如SEQIDNO.12所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.13所示，定 量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所示；hsa-miR-224-5p的反转录引物序列如SEQIDNO.14 所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.15所示，定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16 所示；各microRNA探针的核苷酸序列如SEQIDNO.17所示。

一种人前列腺癌的肿瘤诊断试剂盒，包括如上所述的microRNA引物、探针的组合。