[发明专利]迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷在制备预治流感药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及多酚类化合物，具体涉及迷迭香酸苷，特别是涉及迷迭香酸苷抗流感的用途。

背景技术

流行性感冒简称流感,是由流感病毒引起的呼吸道疾病，具有流行性广、传染性强、发病率高等特点，在儿童、老人和高危人群中的死亡率较高。流感病毒是人类健康的一大威胁。应对流感病毒的主要方式是疫苗和药物治疗。对可能大规模爆发的流感疫情来讲，药物治疗是最好的控制流感病毒传播的手段。目前，抗流感病毒药物包括已在俄罗斯上市的盐酸阿比朵尔和美国FDA批准的4个抗流感病毒药物，后者根据作用机制的不同分为M2离子通道蛋白抑制剂和神经氨酸酶(NA)抑制剂。近年来，对抗流感病毒药物的研究取得了较大进展。M2离子通道蛋白抑制剂是最早上市的流感临床治疗药物，但存在神经毒性，长期服用易产生耐药毒株和对B型流感无效等缺陷。目前抗病毒西药虽然品种较多，但多数选择性低和不良反应较大，中药在抗病毒方面有其独特优点，不良反应相对较低，不易形成耐药性。根据抗流感病毒途径可将中药分为两大类：一类具有直接抑制病毒作用，其中大多数为清热解毒类中药，如金银花，鱼腥草，板蓝根，大青叶，黄芩，黄连等；而另一类通过增强免疫细胞能力发挥间接抗流感病毒作用，如黄芪、丹参等都能诱生干扰素和免疫球蛋白。研究比较清楚的抗流感成分主要有两类：一是多酚类物质，不仅可抑制流感病毒蛋白质和RNA合成，同时也可抑制流感病毒的吸附作用；另一类是黄酮类物质，能抑制流感病毒唾液酸酶的活性和抑制膜融合作用。中药具有很好的抗病毒作用，既可直接杀死病毒而不伤及机体组织，又可调动免疫防御系统的积极性，激发机体的主动免疫机制，增强免疫力，通过主动防御间接发挥抗病毒作用。因而，中药在西药产生耐药性、病毒发生变异的情况下，仍具有潜在治疗作用，具有更广泛的适应性和优越性；并且中草药在我国资源丰富，价格低廉，展现了广阔的研究与开发前景。因此，研制疗效确切、安全高效的治疗流感病毒感染的药物十分必要。

中国药物化学杂志报导了一种迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(李先霞，黄明菊，李妍岚，等.肿节风中抗氧化活性成分研究[J].中国药物化学杂志，2010，20(1)：57-60.)，该化合物的结构如下式(Ⅰ)所示。李先霞的文章中还公开了该化合物的鉴定数据和抗氧化活性，但无公开它的其它生活性和用途。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供化合物迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷的新用途，即在制药中的新应用。

上述在制药中的新应用即为，迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷在制备预治流感药物的应用；其中，所述的流感为H1N1亚型或H9N2亚型流感病毒感染引起的流感。

上述应用中，所述的药物由迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷和医学上可接受的辅料组成，其中所述的迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷在药物中的质量百分含量为5％～10％。

上述应用中，所述的药物为注射液、颗粒剂、胶囊或片剂。

上述应用中，所述的迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷由以下方法制得：

(1)取肿节风药材的干燥粉，用蒸馏水浸提2次，合并提取液，用乙醇沉淀，收集上清液；

(2)将所收集的上清液以水稀释至生药浓度为0.5-1g/ml溶液，上清洗至中性的大孔树脂，然后用乙醇梯度洗脱，收集2倍树脂床体积的30％乙醇洗脱液，加入乙醇使乙醇浓度达80％，静置过夜，取上清浓缩干燥，以60％甲醇复溶，上样于ODS柱，甲醇梯度洗脱，收集40％甲醇洗脱液并浓缩得总迷迭香酸苷；

(3)将总迷迭香酸苷经硅胶柱层析分离，分别以甲醇体积浓度为20％、30％和40％的乙酸-水洗脱，每个比例2个柱体积；合并甲醇体积浓度为30％的乙酸-水的层析组分，60℃减压浓缩至干，得到迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷；其中所述的乙酸-水中乙酸的体积含量为0.05％。

本发明所述的迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(以下简称迷迭香酸苷)在细胞和动物体内均有显著的抑制H1N1亚型或H9N2亚型流感病毒增殖的作用，对流感病毒感染小鼠具有显著保护作用，可用于制备预防和防治人和动物流感的药物，而且安全无毒，疗效稳定。

附图说明

图1为迷迭香酸苷对A549细胞毒性作用的细胞存活率曲线图。

图2为迷迭香酸苷对MDCK细胞毒性作用的细胞存活率曲线图。

图3为各试验组对A549细胞保护作用的细胞存活率条形图。

图4为各试验组对A549细胞内H1N1亚型流感病毒增值的抑制作用的病毒抑制率条形图。