[发明专利]一种用于辅助诊断原发性高血压的检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种用于辅助诊断原发性高血压的检测试剂盒，检测试剂盒内包括一对Toll样受体2基因启动子区甲基化特异性扩增引物及一个甲基化特异性测序引物：甲基化特异性上游引物的核苷酸序列：5'‑Biotin‑GGTAGTTGTAGGGGTAGGAT‑3'；甲基化特异性下游引物的核苷酸序列：5'‑ACCCAAAAAAACTCTAAACCTC‑3'；甲基化特异性测序引物的核苷酸序列：5'‑TTCCAAACAAATAACC‑3'。其优点是能够方便快捷地在分子水平上实现对原发性高血压的检测，检测效率高，针对性强。

技术领域

本发明涉及原发性高血压的辅助诊断技术领域，特别涉及一种用于辅助诊断原发性高血压的检测试剂盒及其应用，尤其指一种能用于检测与原发性高血压相关的Toll样受体2基因启动子区甲基化程度的试剂盒及其应用。

背景技术

原发性高血压(essential hypertension，EH)是遗传因素，环境因素，个体差异等多种因素引起的以体循环动脉血压升高为首要表现的综合征，也是严重危害人类健康的世界性公共卫生问题之一。对于原发性高血压的病因探索日益成为国内外研究的热点。寻找EH相关基因进而阐明血压升高的遗传机制已经成为目前研究的热点。虽然有越来越多的医学研究机构重视并开展EH的病因研究，且研究多集中于相关候选基因的单核苷酸多态性与EH的关联性上，但其发病机理仍未被完全阐释清楚，这无疑阻碍了EH预防及治疗水平的提高。

Toll样受体(Toll-like receptors, TLR)作为白细胞介素受体超家族成员，是细胞外富含亮氨酸重复序列和细胞内重要的信号转导结构域的跨膜受体。而Toll样受体2(TLR2)是己经克隆的Toll样受体家族中表达范围最广的受体，尤其是针对细胞毒素的抗炎症反应具有重要的作用，己经成为多种疾病治疗的新靶点。在TLR2信号通路中，TLR2可与TLR1或TLR6协同作用进而通过Mal/MyD88和NF-κB通路机制激活下游目的基因的表达，最终导致炎症因子的释放。已有研究表明，在外周血管循环中与TLRs信号通路相关炎症因子，如TNF-α和IL-6，C反应蛋白等水平的升高都被认为是高血压的重要危险因素研究。Toll样受体被认为在EH和动脉粥样硬化疾病的发病机制中起着重要的作用；然而其潜在的分子机制仍是不明确的。

目前，国内外还没有公开任何关于用于检测与原发性高血压相关的Toll样受体基因启动子区甲基化程度的试剂盒相关研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供检测效率高，针对性强的一种用于辅助诊断原发性高血压的检测试剂盒及其应用，其中Toll样受体2基因启动子区甲基化水平与原发性高血压的患病率呈负相关。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

一种用于辅助诊断原发性高血压的检测试剂盒，所述的检测试剂盒内包括一对Toll样受体2基因启动子区甲基化特异性扩增引物及一个甲基化特异性测序引物：

甲基化特异性上游引物的核苷酸序列：

5'- Biotin-GGTAGTTGTAGGGGTAGGAT-3'；

甲基化特异性下游引物的核苷酸序列：

5'- ACCCAAAAAAACTCTAAACCTC-3'；

甲基化特异性测序引物的核苷酸序列：

5'-TTCCAAACAAATAACC-3'。

一种用于辅助诊断原发性高血压的检测试剂盒的应用，所述的检测试剂盒能用于原发性高血压辅助诊断、检测或筛查药物。