[发明专利]重组酮还原酶在制备(R)-3,5-二（三氟甲基）苯乙醇中的应用在审
| 申请号： | 201610272803.1 | 申请日： | 2016-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN107326049A | 公开（公告）日： | 2017-11-07 |
| 发明（设计）人： | 竺伟;胡集铖;吴会;高新星 | 申请（专利权）人： | 尚科生物医药（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/22 | 分类号： | C12P7/22 |
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| 地址： | 201318 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 还原酶 制备 甲基 乙醇 中的 应用 | ||
1.一种重组酮还原酶在制备(R)-3,5-二(三氟甲基)苯乙醇中的应用，所述重组酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2、4、6、8、10中任一项所示。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：编码所述重组酮还原酶的氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID No.1、3、5、7、9中任一项所示。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述(R)-3,5-二(三氟甲基)苯乙醇由以下步骤制备：将氨基酸序列如SEQ ID No.2、4、6、8、10中任一项所示的重组酮还原酶、3,5-双三氟甲基苯乙酮、辅因子、缓冲液和氢供体按一定比例混合反应得到产物。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述重组酮还原酶的浓度为5～10g/L、所述3,5-双三氟甲基苯乙酮的浓度为100～200g/L、所述氢供体的体积比浓度为45％～55％、所述辅因子的浓度为0.05～0.1g/L和所述缓冲液的浓度为10～100mM。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述反应在pH＝6～8、温度为25～35℃下进行。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述氢供体为异丙醇。
7.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述辅因子为选自NAD、NADH、NADP和NADPH的任意一种或它们的组合，其中优选为NADP。
8.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液或三乙醇胺缓冲液，其中优选为磷酸盐缓冲液。
9.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述重组酮还原酶由基因工程菌发酵得到，所述基因工程菌选自大肠杆菌或酵母菌，其中优选为大肠杆菌BL21(DE3)。
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