[发明专利]绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法

权利要求书

1.绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)外植体消毒及无菌苗的培养

将采集的绒毛皂荚种子于超净工作台消毒清洗备用，将消毒后的种子接种在培养基上培养无菌苗；

2)愈伤组织的诱导

取种子无菌苗子叶，切成适当大小接种在MS+6-BA3.0mg/L+KT0.3-0.6mg/L+IAA0.1-0.3mg/L培养基上同步诱导出愈伤组织和芽；

3)不定芽的增殖

将不定芽接种于1/2MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1-0.5mg/L+NAA0.2-0.6mg/L培养基中进行增殖培养；

4)不定芽生根培养和驯化移栽

待不定芽长至2.0～4.0cm时，接种到MS+IAA 0.25mg/L+NAA 0.5mg/L生根培养基上，温度控制在24±2℃，光照12h/d，光强2000lx。

2.根据权利要求1所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤1)所述的外植体消毒过程如下：将采集的绒毛皂荚种子于超净工作台70％酒精处理30s，再用0.1％升汞消毒30min，无菌水清洗5次备用；所述的无菌苗的培养过程如下：将消毒后的种子接种在MS培养基上,18-22℃进行发芽试验，待培养至无菌苗长至5-7cm时用于步骤2)。

3.根据权利要求1所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤2)取种子无菌苗子叶，将子叶切成1cm²大小，用于接种，步骤2)的MS培养基中蔗糖为3％，琼脂为0.5％，pH值为5.90-5.95。

4.根据权利要求1所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤3)中待不定芽的幼苗长至1～2cm时接种于培养基中进行增殖培养。

5.根据权利要求1或3或4所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤2)和3)培养时每日补充光照12h，光照强度为2000-2500lx，温度22±2℃。

6.根据权利要求1所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤4)将已经生根的苗置于炼苗室炼苗，炼苗床基质配比为园土与椰糠、泥沙体积比为1:2:1。

7.根据权利要求1所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤2)将绒毛皂荚子叶在MS+6-BA3.0mg/L+KT0.4mg/L+IAA0.3mg/L培养基上同步诱导出愈伤和芽。

8.根据权利要求1所述的绒毛皂荚组织培养再生体系的建立方法，其特征在于，步骤3)中不定芽增殖的培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.3mg/L+NAA0.2mg/L。