[发明专利]洛伐他汀发酵用培养基及发酵过程中的补料方法

说明书

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种洛伐他汀发酵用培养基及发酵过程中的补 料方法。

背景技术

洛伐他汀(Lovastatin)属羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂(HMG-CoA-RI)，通过竞 争性抑制HMG-CoA还原酶活性，阻断内源胆固醇合成，从而起到调脂降脂作用。洛伐他汀由 日本远藤及Albort等人于1979年及1980年首次从土曲霉的发酵液中发现，由美国默克公司 (MerckCo)开发，并于1987年通过FDA批准上市，是推向市场的第一个HMG-CoA-RI。从 上市以来，洛伐他汀便成为临床治疗和预防高血脂症的首选药物，而且近年又发现了它的很 多新药理活性，如抗癌、抗氧化、改善血管内皮细胞功能等，其临床应用还可能扩大。

洛伐他汀分子式：C₂₄H₃₆O₅，洛伐他汀结构式：

目前工业上采用微生物发酵法生产洛伐他汀，在现有的发酵技术中，发酵配方不同的碳 源对发酵水平的影响很大。目前本公司发酵技术采用乳糖为碳源，虽然发酵水平比较高，但 因乳糖的价格很高且在发酵培养基中用量巨大，达到18-20％，在发酵原材料中的成本能占到 70％以上，导致成品成本居高不下。随着洛伐他汀原料药价格的进一步下降，该产品已不能满 足企业的盈利需求。为了降低成本，寻求其他碳源进行发酵工艺优化，降低发酵成本很有必 要。

发明内容

本发明的目的是提供一种洛伐他汀发酵用培养基及发酵过程中的补料方法，以解决上述 问题。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

本发明洛伐他汀发酵用培养基，每100ml培养基中含有以下范围值的组份：初始葡萄糖 0.5-3g/100ml、黄豆饼粉0-4g/100ml、棉籽饼粉2-6g/100ml、玉米浆0.3-1ml/100ml、磷酸 二氢钾0.02-0.05g/100ml、消泡剂0.02-0.08ml/100ml。

洛伐他汀发酵用培养基，每100ml培养基中含有以下范围值的组份：葡萄糖1g/100ml、 黄豆饼粉1g/100ml、棉籽饼粉3g/100ml、玉米浆1ml/100ml、磷酸二氢钾0.05g/100ml、消 泡剂0.05ml/100ml。

本发明发酵过程中的补料方法，存在于将菌种在权利要求1或2所述的洛伐他汀发酵用 培养基上进行发酵培养的过程中，在发酵前期开始进行补加葡萄糖，并开始进行pH自控。

发酵培养基中初始葡萄糖消耗完毕后开始补加约40-60％(G/V)的葡萄糖溶液，补加的 速率为初始发酵液体积的0.1-0.3％(V/V)/h。

所述葡萄糖为粉末结晶状纯品或液糖。

待发酵液pH降至5-7时开始进行pH自控。

pH自控所用的物质为氢氧化钠、氨水、有机碱或无机碱中的一种。

所述菌种为土曲霉或红曲霉中的一种。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

(1)本发明洛伐他汀发酵用培养基，采用葡萄糖为碳源，降低了发酵原材料成本；

(2)本发明洛伐他汀发酵过程中的补料方法，根据葡萄糖的代谢特点，研发了相应的 pH自控工艺，解决了葡萄糖极强的代谢抑制作用的问题，提高了发酵水平；

(3)现有技术中采用葡萄糖发酵所得菌体成分散的菌丝，采用本发明所得的发酵液，菌 体成菌球形态，板框过滤时阻力很小，过滤迅速，滤饼松散、厚实、不粘手，有利于提取工 作。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本 领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的 基本思想，均在本发明的范围之内。

实施例1

洛伐他汀发酵用培养基，含有以下组份及配比：葡萄糖1g/100ml、黄豆饼粉1g/100ml、 棉籽饼粉3g/100ml、玉米浆0.5ml/100ml、磷酸二氢钾0.05g/100ml、消泡剂0.05ml/100ml； 利用该发酵培养基发酵生产洛伐他汀的菌种为土曲霉。