[发明专利]一种红铃虫抗性基因AQ47检测引物组、试剂盒及使用方法有效
| 申请号： | 201610227795.9 | 申请日： | 2016-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN105671194B | 公开（公告）日： | 2019-09-10 |
| 发明（设计）人： | 王玲;万鹏;吴孔明;王金涛;丛胜波;许冬;黄民松 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院植保土肥研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京东方灵盾知识产权代理有限公司 11506 | 代理人： | 郑利华;熊剑 |
| 地址： | 430064 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 红铃虫 抗性 基因 aq47 检测 引物 试剂盒 使用方法 | ||
技术领域
本发明属于检测技术领域，具体而言，本发明涉及一种红铃虫抗性基因 AQ47检测引物组、试剂盒及使用方法。
背景技术
中国是世界上最大的棉花生产国，自1997年种植转Bt基因棉花以来，现 全国年种植面积已达550万hm2，在全世界居第二位，仅次于印度[1]。根据中棉 所、全国优质棉科技服务项目组2007年对全国16个产棉省(市区)的调查结果， 全国棉花播种品种471个，其中转基因抗虫棉157个，占全部品种的33.3％， 其播种面积占总播种面积的66.1％。但值得注意的是，在这些转基因棉花品种 中，除少数品种外为转CryIA+CpTI双价抗虫棉外，绝大多数品种都为转单价 Bt基因棉。而且在157个转基因抗虫棉品种中，除了其中4个为美国引进品种， 其他几乎所有品种的基因来源高度集中，基本都是CryIA基因。按照科学规律， 单价抗虫棉在大田生产上一般只能安全应用8～10年，而转基因抗虫棉在中国 种植时间已达10多年，红铃虫对Bt基因产生抗性的风险已越来越大。因此鉴 定田间靶标昆虫对Bt棉花产生的抗性基因类型、监测其抗性基因频率的变化， 有助于及时掌握田间种群对Bt棉化的抗性发展情况，研究与制定合理的抗性治 理措施，以延缓害虫对Bt棉花抗性的产生。
发明内容
红铃虫对Bt蛋白产生抗性目前已知的主要表现为钙粘蛋白基因突变。从基 因BANK中可以查知，红铃虫的突变类型已达到了23种(见表1)。近年来，我 们从长江流域田间种群中筛选并纯化出一个红铃虫Cry1Ac抗性品系，即AQ47 品系(cDNA:KU254194；gDNA:KU254196)，该抗性品系由钙粘蛋白基因突变导致 红铃虫对Cry1Ac蛋白不敏感。具体突变情况如下：与敏感品系红铃虫(AS)(登 陆号：AY198374.1)相比，AQ47品系红铃虫钙粘蛋白的基因组序列缺失314个 碱基，缺失部分包含外显子区域，导致其cDNA序列对应区域，即第4620～第4826 的207个碱基缺失，蛋白序列缺失69个氨基酸残基，蛋白跨膜结构缺失，无跨 膜区域(参见附图1)。经基因序列比对表明，该突变基因与基因BANK中已注册 的红铃虫所有钙粘蛋白基因均不相同，故其为一种新的抗性基因。
表1基因BANK中已注册的红铃虫钙粘蛋白抗性基因种类
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