[发明专利]欧洲越橘组织快繁培养基及其培育方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，具体涉及欧洲越橘组织快繁培养基及其培育方法。

背景技术

欧洲越橘(Vaccinium myrtillus L.)是生长于中欧地区多年生浆果，主要分布于瑞典、芬兰、乌克兰、俄罗斯北部、拉脱维亚等中北欧高寒地区，我国新疆阿拉泰山区也有分布。其抗寒能力极强，能耐-50℃的极端低温。由于独特的地理环境及气候因素，欧洲越橘果实中的花青素成分种类及含量均高出其他越橘品种。欧洲越橘提取物、欧洲越橘鲜果、果酱和果汁在市场上极受欢迎，鲜果在欧洲市场达5欧元/kg，果酱、果汁在波兰市场售价比其他高出50％。欧洲越橘的果实与叶片中含有儿茶酚蹂质、黄酮、花青素等物质，具有抗氧化、抗炎及诱导癌细胞凋亡等作用，主要用于糖尿病、消化系统、循环系统、眼部疾病和抗肿瘤的治疗。欧洲越橘提取物(bilberry extract)具有较强的抗氧化活性，可以抑制自由基损伤组织机能，提高还原型谷胱甘肽的水平，作为保健食品已被消费者广泛接受，并被美国FDA列为无需认证的食品添加剂，多年来国际市场销售价格一直稳定在500～600美元/kg的水平。

欧洲越橘主要分布在中北欧高寒地区，我国分布极少。黑龙江省林业科学研究所从新疆阿拉泰保护区引种部分欧洲越橘品种开展研究。然而材料稀缺宝贵，只有通过植物组织培养技术才能在短期内繁殖大量苗木，又可保护现有品种的优良遗传特性。然而并未见欧洲越橘组织培养方面的报道，其他越橘品种的培养基并不能满足欧洲越橘试管苗的生长，因此必须开展欧洲越橘的组织快繁培养基的研究。

发明内容

本发明是要解决现有培养基对欧洲越橘组织离体快繁效果差的问题，而提供欧洲越橘组织快繁培养基及其培育方法。

本发明欧洲越橘组织快繁培养基包括腋芽诱导培养基和分化增殖培养基两种培养基；其中，所述的腋芽诱导培养基为含有0.1mg/L～1.0mg/L玉米素的Dy培养基；

所述的分化增殖培养基为含有0.1mg/L～1.0mg/L 6-苄基胺基嘌呤和0.1mg/L～1.0mg/L玉米素的Dy培养基；

其中，所述的Dy培养基是由大量元素、钙盐、微量元素、铁的络合盐、有机物质、强度为1400g/cm²的琼脂和蒸馏水组成；

每1L的Dy培养基中含有所述的大量元素由180mg/L～200mg/L的KNO₃、400mg/L～410mg/L的NH₄NO₃、365mg/L～380mg/L的MgSO₄·7H₂O和160mg/L～180mg/L的KH₂PO₄组成；

每1L的Dy培养基中含有所述的钙盐为680mg/L～690mg/L的Ca(NO₃)₂·4H₂O；

每1L的Dy培养基中含有所述的微量元素由6.3mg/L的H₃BO₃、22.4mg/L的MnSO₄·4H₂O、8.5mg/L的ZnSO₄·7H₂O、0.24mg/L的Na₂MoO₄·2H₂O和0.24mg/L的CuSO₄·5H₂O组成；

每1L的Dy培养基中含有所述的铁的络合盐由73mg/L～74mg/L的C₁₀H₁₃FeN₂NaO₈和37.0mg/L～38.0mg/L的Na₂EDTA组成；

每1L的Dy培养基中含有所述的有机物质由25g/L的蔗糖、0.05mg/L～0.15mg/L的盐酸硫胺素、0.45mg/L～0.55mg/L的烟酸、0.5mg/L～0.6mg/L的盐酸吡哆醇、90mg/L～110mg/L的肌醇和1.5mg/L～2.5mg/L的甘氨酸组成；

每1L的Dy培养基中强度为1400g/cm²的琼脂的含量为6.0g/L～7.0g/L，pH为5.6。

欧洲越橘组织培育方法具体是按以下步骤进行：