[发明专利]六味石榴片在制备抑制B淋巴细胞瘤细胞Daudi细胞增殖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种六味石榴片在制备抑制B淋巴细胞瘤细 胞Daudi细胞增殖药物中的应用及六味石榴片的制备方法。

背景技术

六味石榴胶囊标准号WS-10474（ZD-0474）-2002，记载于国家中成药标准汇编外科 妇科分册。由石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、红花45g、大托叶云实45g作为原料 药制成，具有温肾，暧腰膝的功效。用于妇女白带病。

现有技术中，尚未有六味石榴片在在制备抑制人B淋巴细胞瘤细胞Daudi细胞增殖 药物中的应用的报道，也未见有六味石榴片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而传统 粉碎的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在 临床上应用。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种六味石榴片在制备抑制B淋巴细胞瘤细胞 Daudi细胞增殖药物中的应用。

本发明的另一个目的在于提供一种六味石榴片的制备方法。

本发明的目的是通过如下的方案实现的：

六味石榴片在制备抑制B淋巴细胞瘤细胞Daudi细胞增殖药物中的应用，所述六味石榴 片由石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、红花45g、大托叶云实45g作为原料药制成， 所述六味石榴片的制备方法包括如下步骤：取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、红 花45g、大托叶云实45g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂 的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO₂流量l-3ml/g生药·min，萃取 时间300-400min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制胶囊，干燥，压片， 制成500片，每片重0.30g。

优选的，上述的六味石榴片在制备抑制B淋巴细胞瘤细胞Daudi细胞增殖药物中的 应用，所述六味石榴片的制备方法包括如下步骤：取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒 45g、红花45g、大托叶云实45g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃 取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40℃，CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间 350min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制胶囊，干燥，压片，制成500 片，每片重0.30g。

现有技术中，六味石榴胶囊口服，一次5粒，一日3次。六味石榴胶囊服药量大。采用 本发明方法制备成的六味石榴片每片重0.30g，每次仅需1片，一日服用3次。在具有更多活 性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。

试验一、不同方法制备的六味石榴片中胡椒碱含量的比较

l、仪器及试药本发明六味石榴片：按实施例1方法制备，使用315g原料药，经提取制成 500片，每片重0.30g。原六味石榴胶囊，按照WS-10474（ZD-0474）-2002标准方法制备。 Agilent1200高效液相色谱仪；METTLERAE240电子分析天平；胡椒碱对照品（中国药品生物 制品检定所）。

2、方法

照高效液相色谱法（中国药典2015年版第四部凡例十五）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（77∶ 23）为流动相；检测波长为343nm。理论板数按胡椒碱峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备精密称取胡椒碱对照品适量，置棕色量瓶中，加无水乙醇制成 每1ml含20μg的溶液，即得。

本发明的六味石榴片的供试品溶液的制备取本发明的六味石榴片6g，混匀，取 0.12g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加无水乙醇40ml，超声处理30分钟，放冷，加无水乙醇 稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

对照产品供试品溶液的制备取对照六味石榴胶囊6g，混匀，取0.3g，精密称定，置 50ml棕色量瓶中，加无水乙醇40ml，超声处理30分钟，放冷，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀， 滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定， 即得。

3、结果