[发明专利]人工诱导铁皮石斛在组培瓶内开花的方法

权利要求书

1.人工诱导铁皮石斛在组培瓶内开花的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1）：外植体的灭菌消毒：用无菌水将铁皮石斛蒴果表面的脏物冲洗干净，将铁皮石斛蒴果置于75%乙醇中浸15s，再放入0.1%的升汞溶液中浸15min后，用无菌水冲洗4～5次，每次冲洗5min，备用；

步骤2）：无菌萌发及幼苗生长：用无菌滤纸擦干蒴果表面水后，切开蒴果，将种子取出接种于萌发培养基中，萌发培养基为1/2MS固体培养基添加0.2～1.0mg/L萘乙酸、6.5～8.5g/L琼脂、15～30g/L蔗糖；接种后摇动，使种子均匀散布于培养基中，封口，将接种后的组培瓶移入培养室，培养温度22～28℃，光强1200～2000lx、相对湿度65～80%、每天光照11～16h，5～8d后种子开始萌发，30~45d后长成2～3cm的幼苗；

步骤3）：生根壮苗培养：将步骤2）中的幼苗转接至生根壮苗培养基中；壮苗培养基为1/2MS固体培养基添加3.5～4.5mg/L萘乙酸、8～10%土豆、6.5～8.5g/L琼脂、15～30g/L蔗糖；在温度22～28℃，光强1200～2000lx、相对湿度65～80%、光照14～16h/d，60～80d后长成成苗；

步骤4）：诱导开花：将步骤3）中的成苗转接至开花培养基中，开花培养基为1/2MS固体培养基添加0.8～2.0mg/L萘乙酸、5～10%椰汁、0～10%土豆、0～10%香蕉、6.5～8.5g/L琼脂、15～30g/L蔗糖；在温度25～30℃，光强1500～2500lx、相对湿度65～80%、光照14～16h/d；诱导35～50d后得到开花苗；

步骤5）：采花、继代培养：把步骤4）中的开花苗取出，夹住花托，将花柄剪下，剩余的植株部分重新接入新的开花培养基中进行继续培养，诱导分蘖开花；同样在温度25～30℃，光强1500～2500lx、相对湿度65～80%、光照14～16h/d。

2.根据权利要求1所述的人工诱导铁皮石斛在组培瓶内开花的方法，其特征在于：所述步骤1）、步骤2）、步骤3）、步骤4）和步骤5）均在超净工作台上进行。

3.根据权利要求2所述的人工诱导铁皮石斛在组培瓶内开花的方法，其特征在于：所述铁皮石斛蒴果为成熟未开裂前采收的铁皮石斛蒴果。

4.根据权利要求3所述的人工诱导铁皮石斛在组培瓶内开花的方法，其特征在于：将步骤5)中已开花的植株炼苗后移栽，制作成观赏性花卉或盆景。