[发明专利]一种miR-26a抑制剂及其应用

说明书

本发明提供了一种miR‑26a抑制剂及其应用。所提供的miR‑26a抑制剂核酸序列为AGCCUAUCCUGGAUUACUUGAA。所提供的应用包括miR‑26a抑制剂用于促进抑癌基因PTPN13表达的应用；miR‑26a抑制剂用于制备治疗肺癌药物的应用；miR‑26a抑制剂：AGCCUAUCCUGGAUUACUUGAA与吉非替尼联合用于制备治疗肺癌药物的应用。本发明的miR‑26a抑制剂抑制肺癌中miR‑26a的表达从而间接性解除miR‑26a对抑癌基因PTPN13的抑制作用，达到抑制肺癌生长的目的；同时本发明的miR‑26a抑制剂具有吉非替尼治疗肺癌的增敏作用。

技术领域

本发明属于分子生物学microRNA技术领域，涉及一种miR-26a抑制剂及其用于制备治疗肺癌药物的应用。

背景技术

肺癌死亡率居全世界癌症死亡之首。世界范围内，大约80-85％的病例为非小细胞肺癌(NSCLC)，非小细胞肺癌包括鳞状细胞癌(SCC)，腺癌(ADC)和大细胞癌(LCC)。尽管手术、放化疗及分子靶向治疗在临床上已经广泛应用，但是晚期非小细胞肺癌的生存期短，病死率仍旧很高。

microRNA是非编码小RNA，在转录后水平调节与其相对应靶基因的表达。随着实验研究的深入，发现microRNA参与调节人类恶性肿瘤的发生发展，其中miR-26a与非小细胞肺癌生长以及EGFR-TKIs耐药的关系引起越来越多的关注。阐明miR-26a在非小细胞肺癌中的作用将有助于新药研发和个体化治疗。

发明内容

发明人研究发现，肺腺癌组织较正常癌旁组织miR-26a的表达显著升高；肺腺癌细胞系SPCA1、PC-9、H2170、SW900中miR-26a的表达较正常支气管上皮细胞BEAS-2B显著升高。PTPN13是已知的抑癌基因，miR-26a通过转录后调控抑制PTPN13的表达而发挥促进非小细胞肺癌生长的作用。研究发现PTPN13通过去磷酸化Src而抑制EGFR信号通路，PTPN13的高表达可增强肺癌细胞对EGFR-TKIs的敏感性，因此，miR-26a抑制剂不仅具有抑制肺癌生长的作用，而且可以提高耐药肺癌细胞对EGFR-TKIs的敏感性。进一步研究发现，miR-26a抑制剂通过转染试剂转染入细胞后具有抑制miR-26a表达的作用，对于miR-26a表达高的肺癌细胞，在抑制miR-26a表达后，可以抑制肺癌细胞的生长，并且增加肺癌细胞对EGFR-TKIs的敏感性。

本发明提供了一种miR-26a抑制剂。

本发明所提供的miR-26a抑制剂核酸序列为AGCCUAUCCUGGAUUACUUGAA。

本发明还提供了miR-26a抑制剂：AGCCUAUCCUGGAUUACUUGAA用于促进抑癌基因PTPN13表达的应用。

本发明同时还提供了miR-26a抑制剂：AGCCUAUCCUGGAUUACUUGAA用于制备治疗肺癌药物的应用。

本发明进一步提供了miR-26a抑制剂：AGCCUAUCCUGGAUUACUUGAA与吉非替尼联合用于制备治疗肺癌药物的应用。

本发明的miR-26a抑制剂抑制肺癌中miR-26a从而间接性解除miR-26a对抑癌基因PTPN13的抑制作用，达到抑制肺癌生长的目的；同时本发明的miR-26a抑制剂具有吉非替尼治疗肺癌的增敏作用。

1.miR-26a抑制剂合成：miR-26a抑制剂是化学合成的类似miR-26a反义序列的RNA或DNA。根据本发明所述的miR-26a序列UUCAAGUAAUCCAGGAUAGGCUCCUAUCCUGGAUUACUUGAAUU，采用寡核苷酸生物合成技术，分别合成多个miR-26a抑制剂，通过转染试剂转染入SPCA1细胞后，采用qRT-PCR的方法检测miR-26a的表达，选择抑制效率最高的miR-26a抑制序列：AGCCUAUCCUG GAUUACUUGAA。