[发明专利]表达重组蛋白G的细菌磁颗粒及其应用

权利要求书

1.一种表达重组蛋白G的细菌磁颗粒的制备方法，所述重组蛋白G的序列是：5-ACTT ACAAACTTGT CATTAATGGT AAAACATTGA AAGGCGAAAC AACTACTAAA GCAGTCGACG CAGAAACTGC AGAAAAAGCC TTCAAACAAT ACGCTAACGA CAACGGTGTC GATGGTGTGT GGACTTATGA TGATGCGACT AAGACCTTTA CGGTCACTGA A GGTTCA GGCGGAAGC GGCGGCGGAAGC GGAGGCTCA GGTAGCGGC ACTT ACAAACTTGT CATTAATGGT AAAACATTGA AAGGCGAAAC AACTACTAAA GCAGTCGACG CAGAAACTGC AGAAAAAGCC TTCAAACAAT ACGCTAACGA CAACGGTGTC GATGGTGTGT GGACTTATGA TGATGCGACT AAGACCTTTA CGGTCACTGA A-3，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

a.构建细菌磁颗粒膜蛋白mamC/mamF基因缺失的趋磁细菌MSR-1突变株；

b.构建功能化细菌磁颗粒膜蛋白融合表达质粒；

c.将功能化细菌磁颗粒融合表达质粒通过接合转入到步骤a制得的趋磁细菌MSR-1突变株，构建趋磁细菌MSR-1重组株；

d.对趋磁细菌MSR-1重组株进行培养；具体包括如下步骤：

d-a.向培养罐中加入第一培养基，加热灭菌15-20min，加热温度为110-120℃，将趋磁细菌MSR-1重组株接种到培养罐中，无氧状态进行第一次培养，获得第一培养液；第一次培养的条件为：起始pH值为 5.3-5.5，培养温度为28-30℃，培养时间为1-2天，摇床转速为250-280转/分钟；

d-b.将第一培养液加入含有第二培养基的培养罐中，进行第二次培养；第二次培养的条件为：起始pH值为6.2-6.3，培养温度为20-22℃，培养时间为5-8天，摇床转速为150-180转/分钟，培养过程中通入氧气，通入氧气的方式为：间隔5min，通入20min氧气，间隔5min，通入10min空气，循环5次；所述第一培养基由重量份数为0.2-0.3份甘油酸三乙酯、1.5-3份多聚谷氨酸、0.2-0.3份磷酸吡哆醛、0.5-1份硝酸铵、0.02-0.05份维生素C、10-12份葡萄糖酸钙、0.2-0.3份十二烷基硫酸钠、0.5-1份月桂酰肌氨酸、0.5-1份成纤维细胞生长因子和1-2份琼脂组成；所述第二培养基由重量份数为1-1.5份硬脂酰肌氨酸、0.2-0.5份磷酸二氢钾、10-12份果聚糖、0.5-1份蛋白胨、0.1-0.3份碳酸钙、0.5-1份海藻酸钠、0.5-0.7份硫酸亚铁、1-2份脯氨酸和0.2-0.5份硫酸镁组成；

e.分离纯化，制得功能化细菌磁颗粒。