[发明专利]具有变异衣壳的腺相关病毒病毒体及其使用方法

权利要求书

1.一种重组腺相关病毒(rAAV)病毒体，包含：

a)变异AAV衣壳蛋白，其中相对于相应亲本AAV衣壳蛋白，所述变异AAV衣壳蛋白在衣壳蛋白GH环中包含约5个氨基酸至约11个氨基酸的插入，并且其中与包含所述相应亲本AAV衣壳蛋白的AAV病毒体对视网膜细胞的感染性相比，所述变异衣壳蛋白赋予增强的视网膜细胞感染性；和

b)包含编码基因产物的核苷酸序列的异源核酸。

2.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述插入为式I、式IIa、式III或式IV的肽。

3.根据权利要求2所述的rAAV病毒体，其中所述插入包含选自LGETTRP(SEQIDNO:13)、NETITRP(SEQIDNO:14)、KAGQANN(SEQIDNO:15)、KDPKTTN(SEQIDNO:16)、KDTDTTR(SEQIDNO:57)、RAGGSVG(SEQIDNO:58)、AVDTTKF(SEQIDNO:59)和STGKVPN(SEQIDNO:60)的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述视网膜细胞为光感受器、视网膜神经节细胞、缪勒细胞、双极细胞、无长突细胞、水平细胞或视网膜色素上皮细胞。

5.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述插入位点介于AAV2的氨基酸587和588之间，介于AAV1的氨基酸590和591之间，介于AAV5的氨基酸575和576之间，介于AAV6的氨基酸590和591之间，介于AAV7的氨基酸589和590之间，介于AAV8的氨基酸590和591之间，介于AAV9的氨基酸588和589之间，或介于AAV10的氨基酸588和589之间。

6.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中与包含所述相应亲本AAV衣壳蛋白的AAV病毒体对视网膜细胞的感染性相比，所述rAAV病毒体表现出增强至少10倍的视网膜感染性。

7.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中与包含所述相应亲本AAV衣壳蛋白的AAV病毒体对视网膜细胞的感染性相比，所述rAAV病毒体表现出增强至少50倍的视网膜感染性。

8.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述基因产物为干扰RNA或适配体。

9.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述基因产物为多肽。

10.根据权利要求7所述的rAAV病毒体，其中所述多肽为神经保护多肽、抗血管生成多肽或增强视网膜细胞功能的多肽。

11.一种药物组合物，包含：

a)权利要求1的重组腺相关病毒病毒体；和

b)药学上可接受的赋形剂。

12.一种将基因产物递送至个体的视网膜细胞的方法，所述方法包括向所述个体施用根据权利要求1所述的重组腺相关病毒(rAAV)病毒体。

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述基因产物为多肽。

14.根据权利要求11所述的方法，其中所述基因产物为短干扰RNA或适配体。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述多肽为神经保护因子、抗血管生成多肽、抗凋亡因子或增强视网膜细胞功能的多肽。

16.根据权利要求13所述的方法，其中所述多肽为胶质源性神经营养因子、成纤维细胞生长因子2、神经营养因子、睫状神经营养因子、神经生长因子、脑源性神经营养因子、表皮生长因子、视紫红质、X连锁凋亡抑制蛋白、视网膜劈裂蛋白、RPE65、色素性视网膜炎GTP酶相互作用蛋白-1、外周蛋白、外周蛋白-2、视紫红质或音猬因子。

17.一种治疗视网膜疾病的方法，所述方法包括向有需要的个体施用有效量的根据权利要求1所述的重组腺相关病毒(rAAV)病毒体。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述施用是通过眼内注射。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述施用是通过玻璃体内注射。

20.根据权利要求17所述的方法，其中所述眼病为青光眼、色素性视网膜炎、黄斑变性、视网膜劈裂症、利伯氏先天性黑内障、糖尿病性视网膜病、全色盲或色盲。