[发明专利]一种从冷榨芝麻饼粕中制备芝麻11S蛋白的方法

权利要求书

1.一种从冷榨芝麻饼粕中制备芝麻11S蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）冷榨芝麻饼粕脱油预处理：

将冷榨芝麻饼粕粗粉碎后，采用亚临界萃取或索氏抽提脱油，脱油至饼粕中残油低于1%，然后取出饼粕减压蒸馏除去残留的溶剂，获得脱油后芝麻饼粕，备用；

其中，亚临界萃取条件为：30—60℃萃取3—5次，每次萃取时间为20—40min，每1kg冷榨芝麻饼粕添加2—5L液化丁烷或丙烷作溶剂；索氏抽提条件为：选用乙醚或石油醚作溶剂，50—70℃加热回流6—8h；

2）芝麻11S蛋白提取：

将步骤1）获得的脱油后芝麻饼粕粉碎至80—120目，加入0.5—1.5mol/L的氯化钠溶液配成5—15%悬浊液后，加碱将pH调至8.5—11.5，在300—600 rpm搅拌速度下于30—50℃搅拌提取40—80min；第一次搅拌提取结束后，4000—5000rpm离心20—30min，收集上清液，备用；

将离心获得的沉淀重新加入到0.5—1.5 mol/L的氯化钠溶液中配成固形物含量10—20%的悬浊液，并将pH调至8.5—11.5，在300—600 rpm搅拌速度下于30—50℃再次搅拌提取40—80min；第二次搅拌提取结束后，离心，收集上清液，备用；

合并两次收集的上清液，采用超滤浓缩溶液至原始溶液体积的20—40%，收集浓缩液，备用；

3）芝麻11S蛋白纯化：

将步骤2）所得的浓缩液加酸调pH至6.5—8.0，4000—5000rpm离心20—40min，收集上清液，加入硫酸铵盐析；然后5000—10000rpm离心15—30min，收集沉淀，进行透析除盐，随后将浆液在-40— -60℃下进行冷冻真空干燥，获得芝麻11S蛋白；

步骤2）中超滤所采用的超滤膜截留分子量为200000—400000Da，超滤方式为普通过滤或切向流过滤方式；当采用普通过滤时，超滤膜采用平膜；采用切向流过滤时，超滤膜采用卷式膜，操作压力为0.3—1.0MPa，操作温度20 —40℃；

步骤3）中盐析时，硫酸铵加入量为硫酸铵在上清液中的饱和度的30—40%，盐析条件为：4℃静置10—12h；

步骤3）中透析时，透析袋截留分子量为3000—12000Da，透析条件为：10—20℃透析8—12h。