[发明专利]提取枳实中辛弗林的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物分离技术领域，尤其涉及一种提取枳实中辛弗林的方法。

背景技术

枳实，属芸香科植物酸橙及栽培变种或甜橙的干燥幼果，是一种中药材，主要用于治疗积滞内停、痞满胀痛、大便不通等症状，具有破气消积、化痰散痞的作用。枳实的主要有效成分为生物碱类、黄酮类及挥发油类。其中生物碱类又以辛弗林的为主。辛弗林是枳实提取物中的主要活性成分，是枳实的药理作用中的有效组成。现代研究表明，辛弗林能够促进新陈代谢、收缩血管、升压强心、扩张气管和支气管、氧化脂肪，是一种天然的兴奋剂，无副作用。因此，辛弗林被广泛应用于医药、食品等保健行业。

我国柑橘种植面积广阔，枳实原料来源丰富，价格低廉，具有较大的开发利用价值。随着辛弗林需求量的增加，辛弗林的价值也逐渐提升。利用枳实资源提取辛弗林，将有助于提高枳实的综合利用，充分发挥枳实的药用、食用价值。

辛弗林是生物碱中的麻黄碱类，分子式C₉H₁₃NO，分子结构中存在酚羟基和氨基，因此它具有两性性质。辛弗林难溶于水，但其酸式盐与碱式盐易溶于水。目前从枳实中提取辛弗林的方法主要有浸渍法、渗漉法、煎煮法、热回流法、连续回流法、水提醇沉法、酸提取法，近年来有超临界萃取、树脂色谱法等新型提取工艺，加上微波法、超声法辅助提取，有效地提高了枳实中辛弗林的提取率。传统的煎煮法、回流法提取辛弗林，其加热工序会造成辛弗林损失；渗漉法、浸渍法耗时长、提取率低；有机溶剂提取会造成环境污染；新型提取工艺效果优异但对试验条件有一定限制，且成本高。为了解决这些问题，需要确定一种高效、绿色的辛弗林提取方法。

醇水提取现已成为提取药用植物中活性成分的基本方法，虽提取率较高，但对环境污染大，违背了绿色发展的理念，也不适宜长期工业化生产。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种水酶法辅助超声耦合无醇提取枳实中辛弗林的方法，枳实中辛弗林的提取率高、操作简单、设备简单、成本低、处理条件温和、酶法提取专一性强、提取时间短并且能耗低，环保又安全。

为解决上述技术问题，提供了一种提取枳实中辛弗林的方法，包括以下步骤：

（1）将枳实粉碎成枳实粉，然后与水混合，通过由果胶酶和纤维素酶组成的复合酶进行酶解得到酶解混合液；

（2）将所述酶解混合液进行灭酶处理得到灭酶混合液；

（3）将所述灭酶混合液进行超声波提取得到提取液；

（4）将所述提取液经减压抽滤，冷冻干燥得到辛弗林粉末。

上述的方法，优选的，所述步骤（1）中，所述粉碎具体为：将枳实粉碎后过40～100目筛，得到枳实粉。

上述的方法，优选的，所述步骤（1）中，所述酶解具体为：将所述枳实粉与水混合，加入相当于所述枳实粉质量0.4wt%～1.0wt%的复合酶进行酶解。

上述的方法，优选的，所述酶解的温度为40℃～60℃；酶解时间为0.5h～2h。

上述的方法，优选的，所述枳实粉与水的质量体积比为1g∶6mL～1g∶12mL。

上述的方法，优选的，所述复合酶中，所述果胶酶与所述纤维素酶的质量比为3∶1～6∶1；所述果胶酶的酶活为30000～100000U/g，所述纤维素酶的酶活力为10000～70000U/g。

上述的方法，优选的，所述步骤（2）中，所述灭酶处理的温度为：80℃～90℃，灭酶处理的时间为20min～30min。

上述的方法，优选的，在所述超声提取之前，用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液调节所述灭酶混合液的pH至5.0～6.0。

上述的方法，优选的，所述步骤（3）中，所述超声波提取的功率为300w～500w，超声波提取时间为10min～40min，超声波提取的温度为40℃～60℃。

上述的方法，优选的，所述步骤（4）中，所述冷冻干燥的温度为﹣20℃～﹣40℃；冷冻干燥时间为10～20小时。

本发明的枳实为芸香科植物酸橙及栽培变种或甜橙的干燥幼果，幼果5～6月采摘，果皮绿色，果实呈球形、半球形或卵圆形，直径0.5～2.0cm。采摘后自中部横切为两半，晒干或低温干燥，较小者直接晒干或低温干燥。

与现有技术相比，本发明的优点在于：