[发明专利]冷水七中分离的三萜皂苷类化合物及其在制备T淋巴细胞抑制剂中的应用

说明书

技术领域

本发明属三萜皂苷类化合物领域，具体涉及冷水七中分离的三萜皂苷类化合物及其在制备T淋巴细胞抑制剂中的应用。

背景技术

民族药冷水七为凤仙花科凤仙花属植物冷水七(Impatiens pritzellii Hook.f.var.hupehensis Hook.f.)的根茎，又名红苋﹑一口血﹑霸王七，多年生草本，分布于我国鄂西恩施自治州﹑宜昌市的宜昌﹑宜都﹑长阳﹑五峰﹑秭归等县以及神农架；建始县有栽培，栽培史达百年以上。《中国中药资源志要》记载，其根茎入药，性味辛、甘、凉，有小毒；具有祛风除湿，散瘀消肿，止痛止血，清热解毒之功效。民间单用或配方，用于风湿疼痛，四肢麻木，关节肿大，急性脘腹疼痛，食积腹胀泄泻，月经不调，经来腹痛，肠炎痢疾等症。

目前，国内外对冷水七的研究仅限于生药学，而化学成分和生物活性研究报道较少。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供冷水七中分离的三萜皂苷类化合物及其在制备T淋巴细胞抑制剂中的应用。

冷水七中分离的三萜皂苷类化合物，其具有如下所述的结构式：

各化合物的化学名称如下：

化合物2：刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸-28-O-β-D-吡喃木糖(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(2)，

化合物3：刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸-28-O-β-D-吡喃木糖-(1→4)-[3″′-乙酰基]-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(3),

化合物4：刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸-28-O-β-D-吡喃木糖(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖苷(4),

化合物5：刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯-28-O-β-D-吡喃木糖-(1→4)-[3″′-乙酰基]-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(5),

化合物1：刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯-28-O-β-D-吡喃木糖-(1→4)-[3″′-乙酰基]-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖苷(1)。

上述冷水七中分离的三萜皂苷类化合物的获得方法：冷水七根茎粉碎后，经乙醇加热提取得到乙醇提取物，将乙醇提取物加水混悬，脱酯后，以正丁醇萃取，减压回收有机溶剂得到正丁醇部位；正丁醇部位留样后，利用硅胶柱层析，用氯仿－甲醇溶液梯度洗脱，收集洗脱液，采用MCI柱以水-甲醇溶液梯度洗脱分离，再次收集洗脱液，回收溶剂，得到粗品总皂苷类成分；

将粗品总皂苷类上硅胶柱分离，以CHCl₃:CH₃OH:H₂O体积比为60:20:3的混合溶剂洗脱，收集含目标产物的馏分，再用制备HPLC分离，用含0.05％(体积百分比)甲酸的32％乙腈-水溶液(体积百分比)洗脱，分离得到上述各目标三萜皂苷化合物。

按上述方案，所述氯仿－甲醇溶液梯度洗脱为：依此采用全氯仿、体积比100:1的氯仿-甲醇溶液、体积比50:1的氯仿-甲醇溶液、体积比2:1的氯仿-甲醇溶液、体积比1:1的氯仿-甲醇溶液、全甲醇溶液洗脱，收集体积比2:1的氯仿-甲醇溶液，体积比1:1的氯仿-甲醇溶液，全甲醇溶液的洗脱液。

按上述方案，所述水-甲醇溶液梯度洗脱为：依次用H₂O、30％(体积百分比)的甲醇水溶液、60％的甲醇水溶液、80％的甲醇水溶液洗脱，收集80％CH₃OH:H₂O洗脱液。

上述冷水七中分离的三萜皂苷类化合物在制备T淋巴细胞抑制剂中的应用。

本发明还提供一种T淋巴细胞抑制剂，由有效量的上述冷水七中分离的三萜皂苷类化合物和药学上可接受的辅料组成。所述可接受辅料可以采用本领域常规的辅料，按照常规制备方法制备即可。

按上述方案，所述T淋巴细胞抑制剂包括片剂等口服剂型以及外用的巴布剂等外用剂型。本发明的有益效果：

本发明通过从冷水七中分离得到的三萜皂苷化合物1-5均有抑制T淋巴细胞增殖活性。