[发明专利]麻疹病毒检测试剂盒及使用方法在审

专利信息
申请号: 201610100829.8 申请日: 2016-02-24
公开(公告)号: CN105759029A 公开(公告)日: 2016-07-13
发明(设计)人: 李立和;杨朕;王彦平;李铮;魏志斌 申请(专利权)人: 天津市宝坻区人民医院
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;G01N21/64
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 301800*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 麻疹病毒 检测 试剂盒 使用方法
【权利要求书】:

1.一种麻疹病毒免疫荧光法检测试剂盒,其特征在于用咽拭子擦拭患者咽部,通过粘液溶解剂使咽部上皮细胞表面粘液溶解,用细胞膜穿透剂使咽部上皮细胞膜穿透,使生物化抗体、链霉亲和素偶联异硫氰酸荧光素和甘油进入细胞内,应用链霉亲和素-生物素偶联异硫氰酸荧光素法检测麻疹病毒。

2.根据权利要求1所述的麻疹病毒免疫荧光法检测试剂盒,其特征在于所述粘液溶解剂为含10mg/LN-乙酰-L-半胱氨酸磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1所述的麻疹病毒免疫荧光法检测试剂盒,其特征在于所述细胞膜穿透剂为非离子表面活性剂,组成为聚氧乙烯表面活性剂0.18%,有机季铵盐0.08%。

4.根据权利要求1所述的麻疹病毒免疫荧光法检测试剂盒,其特征在于检测方法为:用咽拭子擦拭患者咽部,加入到2ml含有10mg/LN-乙酰-L-半胱氨酸磷酸盐缓冲液中剧烈震荡,静至30min,高速离心10000g,10min,用磷酸盐缓冲液调整细胞数至100个/μl,点片到含有多聚赖氨酸载玻片上,56℃烘干杀死病毒并固定,密封,-70℃低温保存制成生物玻片。实验时,将生物玻片放置室温后,滴加细胞膜穿透剂50μl静置1min,0.01mol/L磷酸盐缓冲液洗3次,滴加0.01mol/L磷酸盐缓冲液1:100稀释的50μl生物素化抗麻疹病毒抗体IgM,37℃30min,0.01mol/L磷酸盐缓冲液洗2min3次;滴加0.01mol/L磷酸盐缓冲液1:100稀释的链霉亲和素-生物素偶联异硫氰酸荧光素,37℃60min,0.01mol/L磷酸盐缓冲液洗2min4次;封片剂封片,荧光显微镜10ⅹ40倍视野下观察;异硫氰酸荧光素在490~495nm激发,在520~530nm发射荧光,呈黄绿色,即可判断患者感染麻疹病毒。

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