[发明专利]焦磷酸测序法检测ABCC10基因试剂盒及方法

权利要求书

1.一种焦磷酸测序法检测ABCC10基因多态性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如下引物：

(1)扩增引物：

ABCC10的rs9349256上游引物：5′-CCTGTTCACCTCCTGTTCTGAGTT-3′；

ABCC10的rs9349256下游引物：5′-AATGTGGTGGAGGCAATTCA-3′；

其中，下游引物的5′进行生物素标记；

(2)测序引物：

ABCC10的rs9349256测序引物：5′-TTCACTCTCTCCTGACC-3′。

2.一种应用权利要求1所述的试剂盒检测ABCC10基因多态性的方法，包括如下步骤：

(1)DNA提取；

(2)聚合酶链反应

配制50μlPCR扩增体系，包含：10×PCRbuffer5.0μl，dNTP1.5μl，ABCC10-上游引物0.5μl，ABCC10下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水40μl，模板2μl；按照下面的循环参数设置扩增仪：95℃5min预变性；然后依次在95℃30S,55℃30S,72℃30S,进行36个循环；再在72℃保持3min，最终保持在4℃，得扩增产物；

(3)焦磷酸测序单链样本纯化；

(4)焦磷酸测序；

(5)焦磷酸测序结果分析。