[发明专利]抗肿瘤小分子多肽PIDDΔ及其载体和应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体是一种抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ及其载体和 应用。

背景技术

目前，肺癌的发病率和死亡率均居癌症之首，是对人群健康和生命威胁最大的恶 性肿瘤之一。在中国，由于吸烟人数的快速上升，大气污染的日趋严重等因素，近年来肺癌 发病率和死亡率一直呈明显攀升趋势。尽管近几年肺癌治疗包括化疗有了长足的进步，但 是预后仍然不容乐观。过去25年肺癌患者化疗后的5年生存率仍未见显著提高，仅为 15%。因此，加强治疗肺癌的研究，探索新的治疗途径具有十分重要的意义。

多肽药物是目前生物医药领域最具成长性的崭新领域，以其高效、安全、特异性强 等特点逐渐用于癌症，传染病等预防和治疗。基因的功能最终要通过其表达产物——蛋白 质来实现，生物体的一切活动或功能都离不开蛋白质的物质基础。发现和鉴定具有重要功 能的蛋白质，可为新药的开发带来决定性的影响。并且多肽类药物具有分子量小，在人体内 不结存，无副作用，免疫原性小，活性好等优点成为一个研究的热点。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种抗肿瘤小分 子多肽PIDD^Δ，其具有抑制肺癌细胞增殖的功效。本发明的另一目的是提供一种能表达上述 抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ的载体。本发明还有一目的是提供上述抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ的 应用。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

所述的抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ的编码基因，其DNA序列如SEQIDNO.2所示。

含有所述的抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ的编码基因的载体。

所述的载体，将抗肿瘤小分子多肽PIDD^Δ的编码基因克隆到pCMV-HA真核表达载体 构建而成。

所述小分子多肽PIDD^Δ在制备抗肺癌药物中的应用。

本发明人的前期研究结果表明，PIDD可以通过与Keap1分子相互作用，导致促癌信 号通路Nrf2的激活，进而上调多药耐药蛋白MRP1的表达，促进肺癌细胞的耐药存活。因此， 阻断内源性PIDD与Keap1相互作用，便可抑制Nrf2信号通路的激活，进而抑制肿瘤细胞的生 长及肿瘤细胞的增殖等作用。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下的优点及效果：本发明提供的抗肿瘤 小分子多肽能特异性结合Keap1，阻断细胞内源性PIDD与Keap1相互作用，抑制Nrf2信号通 路激活，达到抗肿瘤的效果，在抗肿瘤药物制备中具有广泛的应用。

附图说明

图1是载体质粒pCMV-HA的结构示意图；

图2是多肽PIDD^Δ重组真核表达载体酶切鉴定结果图；

图3是免疫印迹检测重组多肽PIDD^Δ的表达结果图；

图4是CCK-8实验检测306aa多肽PIDD^Δ对H1299细胞活性的抑制结果图；

图5是PI染色流式细胞术检测306aa多肽PIDD^Δ抑制肺癌细胞进入S期图；

图6是克隆形成实验检测306aa多肽PIDD^Δ抑制H1299细胞增殖结果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。实施例中未注明具体条件的实验 方法，通常按照常规条件，例如分子克隆实验指南（第三版，J.萨姆布鲁克等著，黄培堂等 译，科学出版社，2002年）中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件进行。

实施例1：306aa多肽PIDD^Δ重组

1）重组肽的克隆载体构建