[发明专利]一种提取微生物湿菌体胞内维生素K2粗品的方法

权利要求书

1.一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法，其特征在于，包括 以下步骤：

(1)将发酵液经膜浓缩后离心，得湿菌体；

(2)向湿菌体中加入脱水性有机溶剂，搅拌均匀后，进行预处理，离心， 吸取上清液，得第一次萃取液；

(3)向第一次萃取后的湿菌体中加入有机萃取剂，静置，离心，吸取上清 液，得第二次萃取液；

(4)重复步骤(3)，合并三次萃取液，干燥后，得产物。

2.根据权利要求1所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述发酵液为黄杆菌发酵液，其培养基组份为：甘油20.0g/L，蛋 白胨10.0g/L，酵母提取物1.5g/L，K₂HPO₄4.5g/L，NaCl3.0g/L，MgSO₄·7H₂O。

3.根据权利要求1所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述步骤(1)离心获得的湿菌体其含水量为0～95％。

4.根据权利要求1所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，步骤(2)所述的脱水性有机溶剂为无水乙醇或甲醇。

5.根据权利要求4所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述脱水性有机溶剂的体积mL与湿菌体质量g比为(1～6)：1。

6.根据权利要求1所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述步骤(2)中的预处理采用静置、搅拌或超声波进行辅助。

7.根据权利要求1所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述步骤(3)中的有机萃取剂包括：甲醇、无水乙醇、乙腈、乙 酸、丙酮、氯仿、异丙醇、正丙醇、正丁醇中的一种或几种。

8.根据权利要求7所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述有机溶剂的体积mL与湿菌体的质量g的比为6:1。

9.根据权利要求8所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方法， 其特征在于，所述步骤(3)的萃取时间≥5min，萃取方式采用静置、搅拌或超 声波辅助萃取。

10.根据权利要求1所述的一种提取微生物湿菌体胞内维生素K₂粗品的方 法，其特征在于，各步骤离心的时间均为10min、离心速度均为10000r/min。