[发明专利]一种硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法，属于硫酸软骨素制备技术领域。

背景技术

硫酸软骨素，简称CS，是以动物（猪、牛、马、羊、鸡、鲨鱼等）的软骨为原料的一种高分子酸性粘多糖，一种白色或微黄色粉末，吸水性强，易溶于水而成粘稠液体，不溶于酒精、丙酮、乙醚和氯仿等有机溶剂，其盐类对热较稳定。

研究表明CS在心血管疾病、关节病的防治等方面具有重要的作用，作为保健食品或保健药品长期应用于防止冠心病、心绞痛、心肌梗死、冠状动脉粥样硬化、心肌缺血等疾病，能显著降低冠心病患者的发病率和死亡率，对肿瘤也具有抑制作用，另外，CS也是国内外流行的保健品和化妆品以及医药品的重要原料。

目前，硫酸软骨素通常采用碱-酶解提取法，主要包括以下步骤：

（1）碱提酶解：原料软骨加水浸没，用氢氧化钠调pH为8.5，升温至55～60℃，保温4～6小时，然后加入2%的碱性蛋白酶，保持pH为8.5，保温55～60℃搅拌6～8小时，升温至沸腾15分钟左右，过滤，得滤液；

（2）酒精沉淀：滤液中加入3%重量的氯化钠，降温至室温，按体积的2.5倍加入95%酒精，静止8小时，取沉淀；

（3）氧化：按沉淀：水的重量比为1：10的比例混合水，同时加入3%重量的氯化钠，调pH10～12，加入2%重量双氧水氧化8小时，过滤，取滤液；

（4）酒精沉淀干燥：滤液调pH为6，加入体积的2.5倍量酒精第二次沉淀，沉淀再用95%酒精脱水两次，干燥粉碎得到硫酸软骨素成品。

上述方法由于硫酸软骨素溶液比较粘稠，在醇沉时传统的做法是将酒精加入到硫酸软骨素溶液中使硫酸软骨素结晶析出沉淀下来，这样产生的硫酸软骨素沉淀结晶体容易结块而且粘稠，结晶体中包含的有机溶剂在脱水干燥过程中由于颗粒形状较大且坚硬致密，不容易挥发，致使产品的溶剂残留偏高，>2%，影响产品质量，满足不了客户要求。其次由于沉淀结块粘稠，使得脱水、烘干、粉碎等操作变得困难，浪费能耗。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对目前传统碱-酶解提取法在提取硫酸软骨素时，由于硫酸软骨素溶液比较粘稠，在酒精加入到其中进行醇沉时，使得硫酸软骨素结晶析出的沉淀晶体容易结块、粘稠，且晶体中包含的有机溶剂在脱水干燥的过程中由于颗粒形状较大且坚硬不易挥发，致使产品的溶剂残留偏高，影响产品质量的现状，提供了一种将处理后的鸡血添加入到碱提酶解得到的滤液中，随后通过过夜分层，得到硫酸软骨素结晶析出的沉淀，之后再通过将硫酸软骨素结晶析出的沉淀离心脱水并干燥，从而得到硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法。该方法不仅操作简单，原料易得，具有生产时间短、变废为宝的特点，而且在制备过程中析出的沉淀晶体不易结块、粘稠，且在脱水干燥的过程中溶剂残留量极少，最终使得产品产率提高至75％以上，硫酸软骨素纯度提升至90％以上。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）采集600～800mL新鲜鸡血放入容器中，向其中加入鸡血质量5～10％质量浓度为0.3～0.5％的抗凝剂和鸡血质量3～5％质量浓度为0.8～1.2％的柠檬酸三钠水溶液，混合均匀，静置20～30min，待静置结束，将静置后的鸡血用40～50目的筛子进行粗滤，粗滤1～3次，再用60～70目的筛子进行细滤，直至去除鸡血中的凝固物及其它污物，所述的抗凝剂为肝素、乙二胺四乙酸盐、草酸盐中任一种；

（2）待上述鸡血中的凝固物及其它污物去除后，再向鸡血中以40～45滴/min的速率滴加质量浓度为10％冰醋酸溶液，直至pH值为3.8～4.5时，停止滴加，搅拌均匀，移入紫外灯光下，静置灭菌30～45min，得灭菌后鸡血，在－6～－4℃保存，备用；

（3）取1000～1200g检疫合格的牛气管，用清水洗净，放入煮锅中水煮45～55min，取出冷却，剔除残留的脂肪、结缔组织以及肌肉后，倒入装有3～5L质量浓度为85％的酒精中浸泡3h，待浸泡结束，取出，置于粉碎机中，粉碎10～15min，过110～115目筛，得混合软骨粉末，放入反应釜中；

（4）按固液比为1∶3～1∶4，在上述装有混合软骨粉末的反应釜中加入去离子水，搅拌均匀，其中在搅拌过程中同时以5～8℃/min速率程序升温至38～45℃，随后继续保持搅拌状态，再向其中以35～55滴/min滴加质量浓度为8～10％氢氧化钠溶液，直至pH值为8.3～9.2时，停止滴加与搅拌，保温2～3h；