[发明专利]一种硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法

权利要求书

1.一种硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法，其特征在于具体操作步骤为：

（1）采集600～800mL新鲜鸡血放入容器中，向其中加入鸡血质量5～10％质量浓度为0.3～0.5％的抗凝剂和鸡血质量3～5％质量浓度为0.8～1.2％的柠檬酸三钠水溶液，混合均匀，静置20～30min，待静置结束，将静置后的鸡血用40～50目的筛子进行粗滤，粗滤1～3次，再用60～70目的筛子进行细滤，直至去除鸡血中的凝固物及其它污物，其中所述的抗凝剂为肝素、乙二胺四乙酸盐、草酸盐中任一种；

（2）待上述鸡血中的凝固物及其它污物去除后，再向鸡血中以40～45滴/min的速率滴加质量浓度为10％冰醋酸溶液，直至pH值为3.8～4.5时，停止滴加，搅拌均匀，移入紫外灯光下，静置灭菌30～45min，得灭菌后鸡血，在－6～－4℃保存，备用；

（3）取1000～1200g检疫合格的牛气管，用清水洗净，放入煮锅中水煮45～55min，取出冷却，剔除残留的脂肪、结缔组织以及肌肉后，倒入装有3～5L质量浓度为85％的酒精中浸泡3h，待浸泡结束，取出，置于粉碎机中，粉碎10～15min，过110～115目筛，得混合软骨粉末，放入反应釜中；

（4）按固液比为1∶3～1∶4，在上述装有混合软骨粉末的反应釜中加入去离子水，搅拌均匀，其中在搅拌过程中同时以5～8℃/min速率程序升温至38～45℃，随后继续保持搅拌状态，再向其中以35～55滴/min滴加质量浓度为8～10％氢氧化钠溶液，直至pH值为8.3～9.2时，停止滴加与搅拌，保温2～3h；

（5）待保温结束，在上述混合物中再加入混合软骨粉末质量0.8～1.5％木瓜蛋白酶以及混合软骨粉末质量1.3～1.8％中性微生物蛋白酶，在保持pH值为8.3～9.2的条件下，升温至45～48℃，酶解2～4h，待酶解结束，提升温度为75～85℃，保持5～8min，进行灭酶处理，待灭酶结束，静置冷却至室温，移入高速离心机中，以1100～1200r/min速率离心分离5～10min，去渣，得滤液；

（6）在上述得到的滤液中加入上述滤液质量8～12％质量浓度为25％的氯化钠溶液，搅拌至溶解，随后再向其中加入上述滤液质量85～95％上述步骤（2）得到的灭菌后鸡血，静置过夜，使其分层；

（7）待上述混合物过夜分层，分离上层凝结后的鸡血，随后再用消毒后的注射器抽除中层液体，得到下层硫酸软骨素沉淀；

（8）将上述得到的下层硫酸软骨素沉淀放入离心机中，以4000～4500r/min的转速离心10～15min，进行脱水处理，随后将脱水后的沉淀物置于真空干燥箱中，在80～90℃下干燥45～55min，即可得到一种硫酸软骨素。