[发明专利]蒙药漏芦花指纹图谱建立方法以及质量评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物分析领域，具体涉及中药材指纹图谱建立方法和药材质量评价方法。

背景技术

随着蒙药产业的快速发展，资源不合理利用和环境变迁等原因带来的野生资源日益减少的问题凸显，严重制约了蒙药产业的健康发展。蒙药材的自采自用也很普遍，目前市场上有一些蒙医专用的道地产药材并没有商品流通，有的有市场流通的商品药材，但品种混乱，临床使用情况不清，这就给合理有效的使用蒙药材造成很大困扰。漏芦花就是其中一种，其同名异物现象非常普遍，多被误用同科其他植物头状花序入药。所以选择一种能快速、高效、全面的反映蒙药材质量信息的手段是非常必要和重要的，而指纹图谱技术就是符合这些特点的技术手段，且化学成分指纹图谱亦可鉴别饮片的品质，也可辅助对品种鉴定，能基本反映中药全貌，实现对中药内在质量的控制。

蒙药漏芦花为菊科漏芦属植物祁州漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.的干燥花。蒙药名：洪古尔-珠尔,分布于我国内蒙古、东北、河北、陕西、甘肃、青海、山西、河南、四川、山东等地。入蒙药可杀“粘”、止刺痛、清热、解毒、解表等，主治感冒、心热痢疾、血热及传染性热症等。漏芦花为蒙医临床常用药，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》(蒙药分册)，但无鉴别、检查、含量测定项，《中国药典》2015版中只有关于中药漏芦(祁州漏芦的根)的质量控制方法，但并不适用于漏芦花。这不仅制约了漏芦花资源的有效利用，也无法保证用药的安全性和有效性。

本发明首次建立了蒙药漏芦花指纹图谱，标识了13个共有峰中的8个峰。研究所用的HPLC法操作简单，分离度高，重现性好。建立的标准指纹图谱典型、全面、有代表性，能真实、客观地反映漏芦花所含化学成分的类型、数量和相对含量。

发明内容

本发明提出一种漏芦花指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：取药材粉末，置100mL具塞锥形瓶中，加70％甲醇，超声提取，放置到室温后，再称定重量，用溶剂补足减失的重量，滤过，取滤液以0.45μm微孔滤膜滤过，备用；

2)将供试品溶液注入高效液相色谱仪中，获得指纹图谱，采用的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)，采用梯度洗脱85％B(0min)～78％B(12min)～74％B(13min)～60％B(60min)；检测条件：DAD检测器，检测波长230～400nm；柱温：20～40℃；进样量：5～30μL。

作为优选，色谱柱采用规格为250mm×4.6mm,5μm的YMC-Pack ODS-A色谱柱或者岛津Inertsil ODS-SP HPLC色谱柱。

进一步的优选是，步骤1)中，取药材粉末约0.2g，精密称定，加入70％甲醇25mL，超声提取40min，放置到室温后，再称定重量，用溶剂补足减失的重量，滤过，取滤液以0.45μm微孔滤膜滤过。

更优选地，流速为1.2ml/min；采用DAD检测器，检测波长254nm；柱温25℃；进样量10μL。