[发明专利]蒙药漏芦花指纹图谱建立方法以及质量评价方法有效
申请号: | 201610067803.8 | 申请日: | 2016-01-29 |
公开(公告)号: | CN105628834B | 公开(公告)日: | 2017-06-16 |
发明(设计)人: | 王晓琴;杜月;李彩峰;特布沁;黄慧;韩国庆 | 申请(专利权)人: | 内蒙古医科大学 |
主分类号: | G01N30/86 | 分类号: | G01N30/86;G01N30/06 |
代理公司: | 北京彭丽芳知识产权代理有限公司11407 | 代理人: | 汪永生,彭丽芳 |
地址: | 010050 内蒙古自治区呼和浩*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蒙药 漏芦 指纹 图谱 建立 方法 以及 质量 评价 | ||
1.一种利用指纹图谱评价漏芦花药材质量的方法,包括以下步骤:
建立标准指纹图谱,包括:a)供试品溶液的制备:分别制备11个不同批次的漏芦花样品供试品溶液,取样品粉末,置100mL具塞锥形瓶中,加70%甲醇,超声提取,放置到室温后,再称定重量,用溶剂补足减失的重量,滤过,取滤液以0.45μm微孔滤膜滤过,备用;b)对照品溶液的制备:称取1)蜕皮甾酮、2)槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、3)芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、4)山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷、5)泥胡木脂素B苷、6)木犀草素、7)芹菜素、8)5,7,4’-三羟基-3’-甲氧基黄酮共8种对照品,用甲醇溶解定容,制成一定浓度的单一对照溶液,微孔滤膜0.45μm滤过,备用;c)将各供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪中,分别获得指纹图谱,色谱条件为:色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;流动相:乙腈A-0.2%磷酸水溶液B,采用梯度洗脱:0min~12min~13min~60min、85%B~78%B~74%B~60%B;检测条件:DAD检测器,检测波长230~400nm;柱温:20~40℃;进样量:5~30μL;d)用相似度评价软件计算11个样品的相似度,从中确定一个相似度最高的作为标准指纹图谱;
用上述相同的方式获得一个待评价样品的指纹图谱;
用前述相似度评价软件评价所述待评价样品指纹图谱和所述标准指纹图谱的相似度,相似度大于0.9则判定所述待评价样品质量符合要求。
2.如权利要求1所述的方法,其中,色谱柱采用岛津Inertsil ODS-SP HPLC色谱柱或者规格为250mm×4.6mm,5μm的YMC-Pack ODS-A色谱柱。
3.如权利要求1所述的方法,其中,步骤a)中,取药材粉末约0.2g,精密称定,加入70%甲醇25mL,超声提取40min,放置到室温后,再称定重量,用溶剂补足减失的重量,滤过,取滤液以0.45μm微孔滤膜滤过。
4.如权利要求3所述的方法,其中,流速为1.2mL/min;检测波长254nm;柱温25℃;进样量10μL。
5.如权利要求4所述的方法,其中,所述标准指纹图谱包含以下13个共有峰,各峰的保留时间分别为:5.40,11.24,16.47,17.46,18.53,18.91,20.92,22.62,23.01,25.43,27.66,33.59,35.22。
6.如权利要求5所述的方法,其中,所述13个共有峰的相对峰面积分别为0.164,1.000,1.280,0.378,0.115,0.061,0.617,0.056,0.251,0.446,0.491,0.268,0.038。
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