[发明专利]一种微贮添加剂、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种微贮添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆 菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、产朊 假丝酵母、酿酒酵母和沼泽红假单胞菌剂按单位质量活菌数比例为： (500-600)：(500-600)：(10000-75000)：(10000-73000)：(10000-75000)： (10000-73000)：(10000-73000)：(10000-65000)：(10000-60000)： (10000-75000)：(10000-75000)：(50-70)：1混合，制备得到微贮添加剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的微贮添加剂的制 备包括以下步骤：

(1)菌种活化；

(2)种子液制备；

(3)培养基配制及接种；

(4)发酵；

(5)菌体收集及菌剂制备；

(6)微贮添加剂的制备。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的 菌种活化包括如下步骤：将保藏的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆 菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸 片球菌、戊糖片球菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母和沼泽红假单胞菌，分别置于 灭菌的1％红糖水中活化2h，芽孢菌再转接入已灭菌的普通肉汤培养基、乳酸 菌转入MRS、酵母菌转入YPD斜面培养基中，置于28-35℃，待菌落长出后分 别接入已灭菌的普通肉汤MRS、YPD培养基中，在与对应斜面培养基相同温度 的摇床中培养24-48h；

优选地，步骤(2)所述的种子液制备包括如下步骤：将已灭菌的500mL 与试管培养基成分相同的13个锥形瓶培养基，摇瓶于32-34℃空白培养48h， 检查确认无杂菌后包扎，用紫外线照1h备用；将普通肉汤培养基、MRS、YPD 长出的菌落、挑单菌落于与其相对应的己灭菌的13个培养基锥形瓶中，置于 28-35℃下摇瓶培养24-48h，镜检无杂菌后制成种子液。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3) 所述的培养基配制及接种包括如下步骤：

(a)将发酵罐和所用设备121℃灭菌30min，维持罐压0.1MPa；

(b)配置培养基：将毛尖蘑菇菌、松茸蘑菇菌、灰树花蘑菇菌、鸡腿蘑、 白蘑菇菌和黄蘑菇菌按2:2:1:3:1:1的比例制成蘑菇菌粉放入蜂蜜、红糖，高温 消毒，加入井水消毒，降温后分别接菌发酵，再加入淀粉酶、麦芽糖酶和木聚 糖酶，反应72小时产生自组互控菌群及产生生物酶；

优选地，所述步骤(b)中蘑菇菌粉、蜂蜜和红糖的比例为70:3:125；

优选地，所述步骤(b)中的消毒温度为150-200℃，优选为160-180℃，进 一步优选为160℃；

优选地，所述淀粉酶、麦芽糖酶和木聚糖酶的比例为1：1：1；

优选地，所述淀粉酶、麦芽糖酶和木聚糖酶的总酶量与蜂蜜的比为1:1。