[发明专利]HA/RGD双受体介导多靶点给药系统的制备方法

说明书

本发明公开了一种HA/RGD双受体介导多靶点给药系统的制备方法。包括以下步骤：透明质酸和硫酸肼溶解在肼中，在惰性气体保护60～115℃反应1～12h得脱乙酰化的HA；将RGD溶解于水，EDC/NHS溶液活化，调节溶液pH至3.5～6.5，滴加脱乙酰化的HA水溶液4～38℃反应1～12h得HA‑RGD；将CLB‑ADH的水溶液滴加入所述HA‑RGD水溶液中，搅拌反应1～12h得到HA/RGD双受体介导多靶点给药系统。HA和RGD合用能更有效地增强药物与肿瘤细胞的结合，提高在肿瘤部位的有效浓度，增效减毒，同时杀死肿瘤细胞和抑制肿瘤新生血管的生长，发挥“一药多效”的作用，能有效逆转肿瘤耐药性。

技术领域

本发明涉及药品领域，具体涉及一种双受体介导多靶点给药系统的制备方法。

背景技术

癌症是危害人类生命健康的严重疾病之一，发病率逐年上升，寻找恶性肿瘤有效的防治方法迫在眉睫。化学药物治疗是当今治疗肿瘤的主要手段之一，但化疗药物在作用于靶细胞时往往累及正常细胞，产生免疫功能低下、骨髓抑制、脏器受损等毒副作用，严重的副作用和多药耐药等问题使其应用受到很大的限制。

靶向给药系统是一种新的药物制剂类型的一种较为理想的给药方式。利用靶向给药系统的特性，可以较为精确的控制药物释放到特定的组织、器官或细胞，延长药物的传递过程，长时间的保持靶区的药物浓度，具有毒性小，生物利用度高等优点。但在靶向给药系统的研发过程中，也遇到了一些需要解决的问题：一是目前开发上市的靶向药物(包括单克隆抗体)的靶向性仍然不理想；二是靶向给药系统的稳定性，特别是通过静脉注射给药靶向制剂在血液中的稳定性；三是需要继续发展新的靶向给药系统的载体材料，使其具有更好的生物相容性，生物可降解性以及更好的缓释速度。

透明质酸(HA)，又名玻尿酸，是由双糖单位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的高级多糖类，广泛分布在软结缔组织细胞外基质中。HA具有良好的生物相容性、生物降解性和隐形性，是一种理想的生物医用高分子材料，偶联有HA组分的纳米粒子能有效避免药物突释，可用于药物的缓控释，在临床医学中具有广泛的应用。研究发现大部分实体肿瘤组织外周的透明质酸增高，同时肿瘤细胞表面的透明质酸受体——CD₄₄表达上调，利用透明质酸/CD₄₄受体介导作用可以提高抗瘤药物的主动靶向。

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)三肽是许多细胞表面某些整合素分子特异性配体之一。一般认为，肿瘤血管生成是肿瘤生长的关键过程，研究表明，整合素αvβ3受体在肿瘤血管内皮细胞生成中发挥着关键作用，目前已发现25余种不同的整合素受体亚型。近年来，RGD肽与整合素αvβ3受体之间相互作用的研究逐渐成为生物材料研究的热点，通过在生物材料表面引入RGD肽，有望实现细胞识别，促进信号传递，抑制肿瘤新血管生成，提高细胞与生物材料表面的粘连，加速细胞对载体的内吞，达到更有效、精确和安全治疗肿瘤的目的。

苯丁酸氮芥属氮芥类衍生物，具有双功能烷化剂作用，可形成不稳定的亚乙基亚胺而发挥其细胞毒作用，干扰DNA和RNA的功能。苯丁酸氮芥抗瘤谱比较广，对多种肿瘤均有作用，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用，属于周期非特异性药物，较大剂量可致各类白细胞减少，造成严重的骨髓抑制。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中药物靶向性不理想稳定性差的问题，提供一种新型的靶向方案，通过协同治疗使药物在癌细胞内快速积累。

为达到上述目的，采用技术方案如下：

HA/RGD双受体介导多靶点给药系统的制备方法，包括以下步骤：

1)透明质酸(HA)的脱乙酰化：将透明质酸和硫酸肼溶解在肼中，在惰性气体保护60～115℃反应1～12h，用HIO₃去除残留肼，用HI去除过量的HIO₃，提纯干燥，即得脱乙酰化的HA；