[发明专利]ADRB1，GRK5基因多态性的检测方法

说明书

技术领域：

本发明属于生命科学领域，涉及医学和生物技术，具体是提供不同检测方法(包含但不限于改良 测序方法和Taqman探针基因分型的方法)同时对β受体信号通路相关基因ADRB1，GRK5上的2个 SNP位点(ADRB1：rs1801253以及GRK5：rs17098707)进行快速准确的基因分型，便于临床对β受 体阻滞剂的疗效进行评估。

背景技术：

心力衰竭(简称心衰)是一种以心脏泵血不足而导致全身多器官灌注不足以及循环淤血为表现的 复杂临床综合征，合并有神经内分泌系统的异常改变，是包括高血压、冠心病、心肌病在内的多种心 血管疾病的终末阶段。β肾上腺素能受体(简称β受体)阻滞剂因能通过阻断过度活化的肾上腺能系 统，有效降低心脏氧耗，改善心肌重构和患者长期预后，作为标准方案用于包括心衰在内的多种心血 管疾病的治疗。但更多的临床试验和多中心的meta分析报导β受体阻滞剂的总体获益来自部分人群， 即表现出个体差异性和种族差异性。

目前，已有众多文献报道β肾上腺素能受体通路的基因多态性会影响β受体阻滞剂的疗效，进而 潜在的影响心衰患者的预后。StephenB.Liggett等人2006年发表的一项1040人的欧洲心衰人群的 研究表明β1受体基因ADRB1-Arg389Gly位多态性导致氨基酸改变影响了布新洛尔的治疗效果。与安 慰剂组相比，ADRB1-Arg-389纯合基因型的患者接受β受体阻滞剂布新洛尔治疗的患者死亡率下降 38％(p＝0.03)，再住院率下降34％(p＝0.004)，而基因型为ADRB1-Gly-389基因型的患者治疗组和 安慰剂组之间预后无统计学差异。另一项224例心衰患者研究通过检测治疗后心功能的改善证实了 ADRB1-389位点对β受体阻滞剂治疗效果的影响，具体为：与ADRB1-Gly-389基因型的患者相比， ADRB1-Arg389-纯合基因型的患者治疗后左室射血分数明显改善(8.7±1.1％vs.0.93±1.7％，p<0.02)。 GRK5是β受体下游的G蛋白偶联受体激酶，在其41位氨基酸的多态性GRK5Gln41Leu位点在非洲 人群的次要等位基因频率约是欧洲人群的10倍。两项研究同时证明在不服用β受体阻滞剂的情况下 GRK5-Leu41的患者的远期生存率更高(Logrankp＝0.013)。而GRK5-Gln41基因型的患者对β受体 阻滞剂的治疗反应更好，具体表现为GRK5-Gln41纯合基因型的患者治疗后非心脏移植的生存时间更 长(HR＝0.22；95％CI,0.12-0.40；p<0.001)，而GRK5-Leu41基因型的患者是否接受β受体阻滞剂治 疗，预后无统计学差异(HR＝0.78；95％CI,0.35-1.17；p＝0.53)。

从现有的研究中我们总结出β肾上腺素系统的基因多态性在心衰的发生中不起主要作用，但能 修饰β受体阻滞剂相关的临床表型，包括β受体阻滞剂对短期心功能的改善和长期生存率的影响，对 临床指导个体化医疗和治疗效果评估有重要指导意义。但至目前为止，根据文献报道，针对β受体肾 上腺素能系统基因多态性的检测方法为直接测序的方法包括传统Sanger测序法和Pyrosequencing测序 的方法。其优点为测序结果准确，但操作流程较复杂，耗时较长，成本较高，限制了其在实际临床工 作中的发展和应用，无法满足快速指导临床评估的需求，一种新的快速、准备、低成本的检测方法成 为迫切需求。

发明内容：

为弥补现有技术的不足，本发明旨在提供针对以上ADRB1-Arg389Gly(rs1801253)和/或 GRK5-Gln42Leu(rs17098707)2个多态性位点快速准确的检测方法，包括但不限于改良测序和Taqman 探针基因分型的方法，为临床评估心衰患者预后和/或β受体阻滞剂的预期疗效提供指导方案。

为此，本发明提供以下技术方案：

本发明提供一种心衰患者预后和/或β受体阻滞剂药物治疗疗效评估的遗传标志物，其中，所述遗 传标志物是ADRB1-Arg389Gly(rs1801253)和/或GRK5-Gln41Leu(rs17098707)多态性位点的基因 分型。优选的，所述遗传标志物是(1)ADRB1-Arg389Gly(rs1801253)或(2)GRK5-Gln41Leu (rs17098707)多态性位点的基因分型。

本发明还提供一些用于检测上述标志物的试剂。