[发明专利]一种利用质谱数据分析蛋白交联位点的方法在审
申请号: | 201610012183.8 | 申请日: | 2016-01-11 |
公开(公告)号: | CN105651852A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 吴志华;赵瑞芳;连君;陈红兵;李欣;佟平;杨安树 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62 |
代理公司: | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人: | 施秀瑾 |
地址: | 330031 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 数据 分析 蛋白 交联 方法 | ||
1.一种利用质谱数据分析蛋白交联位点的方法,其特征是步骤如下:
(1)理论酶切肽段的分析与筛选;
选取合适的酶,以能将各交联位点分开为宜;根据所选择的酶的特异性酶切位点,列出 酶切后可能出现的所有片段,筛选出含有潜在交联位点的酶切片段,并计算每个肽段的分 子量;
(2)理论交联片段分子量的预测;
将步骤(1)中含有潜在交联位点的片段进行组合,即获得理论交联片段库;计算理论交 联片段库中各交联片段的分子量:理论交联片段的分子量为交联片段的分子量之和减去交 联反应时消去基团的分子量,或者理论交联片段的分子量为交联片段的分子量之和加上交 联反应时附加基团的分子量;再根据可能的电荷量计算获得的各交联片段可能的质荷比;
(3)交联蛋白的酶切及质谱分析;
采用步骤(1)选择的蛋白酶对交联复合物进行酶切,并按照常规方法对酶切片段进行 质谱分析;
(4)数据比对与分析;
查看质谱数据,得到各峰对应的质荷比,与步骤(2)计算的理论交联片段质荷比进行匹 配,匹配成功则理论的交联片段即为实际交联片段,理论预测的交联位点为真,由此获知蛋 白质交联的位点。
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