[发明专利]一种猕猴桃增殖培养基及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种猕猴桃增殖培养基及其制备方法和应用，属于植物无性繁殖材料技术领域。

背景技术

猕猴桃属猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(Actinidia)多年生藤本植物,是20世纪最早经人工驯化栽培的四大野生果树之一，其果实具有丰富的营养价值和良好的药用价值,尤含大量Vc,享有“Vc之王”美称。红阳猕猴桃属于中华系列猕猴桃，是猕猴桃家族中罕见的红心猕猴桃，是在四川称猴桃原产地苍溪发现的自然变异品种，营养价值极高，且果肉细嫩，口感香甜，早果性、丰产性和抗逆性强，深受市场欢迎，具有极高的推广前景。

红阳猕猴桃是雌雄异株，采用种子繁殖，周期长，且不易获得大批雌株群体。目前红阳猕猴桃的常规育苗方法包括嫁接法和扦插法。但嫁接苗童期生长缓慢，育苗周期达两年以上；扦插苗成活率和繁殖效率低。仅通过传统方式获得种苗已经不能满足日益扩大的市场需求。因而采用组织培养技术繁殖猕猴桃成为重要的良种繁育途径。以往对红阳猕猴桃的研究中，普遍以MS为基本培养基，得出丛生芽诱导率最高只有27.27％，褐化率高，而且猕猴桃组培苗节间距离较短，极大地影响了猕猴桃快繁速度，制约了红阳猕猴桃的规模化生产。

发明内容

发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供一种降血糖燕麦膳食纤维及其制备方法。

技术方案：为实现上述目的，本发明提供了一种猕猴桃增殖培养基，其主要由改良WPM培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、赤霉素(GA)、蔗糖、蔗糖和琼脂所制成；所述改良WPM培养基主要由大量元素、微量元素、铁盐和有机物所制成。

作为优选，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为1-2mg/L；所述萘乙酸的浓度为0.1-0.2mg/L；所述赤霉素的浓度为0.2-0.5mg/L；所述蔗糖的浓度为30g/L；所述琼脂的浓度为8g/L。

作为另一种优选，所述培养基的pH为5.6，所述猕猴桃为红阳猕猴桃。

作为另一种优选，所述大量元素由硝酸铵、硝酸钾、二水氯化钙、四水硝酸钙、硫酸镁、硫酸钾和磷酸二氢钾所提供；所述微量元素由硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、钼酸钠和硼酸所提供；所述铁盐由乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁所提供；所述有机物为烟酸、盐酸硫胺素、盐酸毗哆醇、肌醇和甘氨酸。

作为另一种优选，所述每一升改良WPM培养基中包括如下：

412.5mg硝酸铵、400mg硝酸钾、96mg二水氯化钙、278mg四水硝酸钙、370mg硫酸镁、900mg硫酸钾和340mg磷酸二氢钾，提供大量元素；

22.3mg硫酸锰、8.6mg硫酸锌、0.025mg硫酸铜、0.25mg钼酸钠和6.2mg硼酸，提供微量元素；

37.3mg乙二胺四乙酸二钠和27.8mg硫酸亚铁，提供铁盐：；

0.5mg烟酸、0.5mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、l00mg肌醇和2mg甘氨酸，提供有机物；

本发明还提供了所述猕猴桃增殖培养基的制备方法，包括以下步骤：

(1)配制改良WPM培养基：

①50倍大量元素母液的配制：取硝酸铵、硝酸钾、硫酸镁和硫酸钾，用蒸馏水溶解定容配成母液Ⅰ；取二水氯化钙和四水合硝酸钙，用蒸馏水溶解定容配成母液Ⅱ；取磷酸二氢钾，用蒸馏水溶解定容配成母液Ⅲ；

使用时按用量分别取母液Ⅰ，母液Ⅱ，母液Ⅲ；

②200倍的微量元素母液的配制：取硫酸锰，硫酸锌，硫酸铜，钼酸钠和硼酸，用蒸馏水溶解定容配成母液Ⅳ，使用时按用量取母液Ⅳ；

③100倍的EDTA-铁盐母液的配制：取乙二胺四乙酸二钠，加蒸馏水溶解，然后加入硫酸亚铁，加热溶解，定容，配成母液Ⅴ，使用时按用量取母液Ⅴ；

④100倍的有机成分母液的配制：取烟酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，肌醇和甘氨酸，用蒸馏水溶解定容，配成母液Ⅵ，使用时按用量取母液Ⅵ；

按照用量取各种母液混合，得未定容的改良WPM培养基；

(2)激素母液的配制：称取萘乙酸，先用体积浓度95％的酒精溶解，然后加水定容，配成的萘乙酸母液，使用时按用量取萘乙酸母液；称取赤霉素，先用体积浓度95％的酒精溶解，然后加水定容，配成赤霉素母液，使用时按用量取赤霉素母液；称取6-苄氨基腺嘌呤，先用NaOH溶解，然后加水定容，配成6-苄氨基腺嘌呤母液，使用时按用量取6-苄氨基腺嘌呤母液；