[发明专利]使用肽‑蛋白质轭合物治疗肿瘤

说明书

技术领域

本发明一般涉及用于治疗肿瘤并且用于增加患有肿瘤的患者的存活时间的方法和组合物。还提供了用于调节或正常化肿瘤内的基质和/或脉管系统并改进肿瘤内的血管功能的方法和组合物。本发明涉及包括轭合至肿瘤导向肽的LIGHT多肽的蛋白质轭合物的用途，任选地作为免疫治疗、化疗和/或放射治疗的辅助物。

背景技术

为了获得其生长和转移至远处器官的营养物，癌细胞选定(co-opt)宿主脉管系统，诱导新血管形成(血管生成)，并从骨髓募集内皮细胞和其他基质细胞。得到的肿瘤内脉管系统在结构上和功能上是异常的。肿瘤血管是渗漏的和扩张的，导致间质高血压(interstitial hypertension)。血管衬里的内皮细胞具有畸变形态，并且提供内皮细胞支撑的周细胞松散地附接、未成熟或缺失。基底膜也通常是异常的。

肿瘤血管中这些结构和功能异常建立了具有受损的氧和酸中毒的异常的肿瘤微环境。这种缺氧进而可促进肿瘤入侵、转移和恶化。由基质细胞引起的异常的肿瘤微环境(包括肿瘤脉管系统的不规则)也可阻碍抗癌治疗的有效递送，从而降低其功效。

在设想肿瘤的新治疗时，很多努力集中在使用抗血管形成剂减少或革除这些血管异常，这些抗血管形成剂还暂时正常化肿瘤脉管系统并且缓解缺氧(参见例如简(Jain)，2001自然医学(Nat.Med.)9,685-693)。然而抗血管形成剂可引起对肿瘤血管的大量损伤(包括破坏)。

因此，需要下述新型治疗：可以有效靶向肿瘤脉管系统而不引起已知抗血管形成治疗的损伤作用。

发明内容

本发明的第一个方面提供了用于在肿瘤中调节肿瘤基质，使肿瘤脉管系统正常化和/或改进血管功能的方法，该方法包括将肿瘤暴露于有效量的包括LIGHT多肽(也称作TNFSF14)和肿瘤导向肽的肽-蛋白质轭合物。

该LIGHT多肽可包括SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:2中所示的核苷酸序列编码。

该肿瘤导向肽可选自例如含有RGR的肽、含有NGR的肽、含有RGD的肽、含有CGKRK的肽以及含有CREKA的肽。在一个示例性实施例中，该肿瘤导向肽是含有RGR的肽。该含有RGR的肽可包括氨基酸序列CRGRRSTG(SEQ ID NO:5)。在一个实施例中，该含有RGR的肽轭合在该LIGHT多肽的C-末端。该肿瘤导向肽可通过一个接头序列轭合至该LIGHT多肽。在示例性实施例中，该接头可包括一个或多个(任选两个或更多个、或三个或更多个)甘氨酸(G)残基。

在第一个方面的一个实施例中，该LIGHT-RGR轭合物的有效量可以是在约0.2ng和20ng/kg体重之间。在一个实例中，该有效量可以是约6ng/kg体重。

肿瘤脉管系统的所述正常化和/或肿瘤血管功能的改进可以包括或者表征为以下一种或多种：基质细胞(包括内皮细胞、周细胞、成纤维细胞、巨噬细胞及其他肿瘤内免疫细胞)的因子/细胞因子的分泌变化、大血管的选择性损失；减少的血管渗漏；周细胞重附接至血管；周围胶原IV纤维的排列；增强的CD8+和/或CD45+T细胞浸润；增加的炎性粘附分子的表达；以及增加的α平滑肌(αSMC)-阳性肿瘤周细胞中血管平滑肌标记物的表达。在一些实施例中，肿瘤脉管系统的所述正常化和/或肿瘤血管功能的改进可包括或导致以下一种或多种：肿瘤血管完整性的恢复、肿瘤血管渗漏的减少和/或肿瘤灌注的增加。

肿瘤脉管系统的所述正常化和/或肿瘤血管功能的改进可影响或诱导与肿瘤(例如脑肿瘤)相关的浮肿形成的减少。肿瘤脉管系统的所述正常化和/或肿瘤血管功能的改进可影响或诱导肿瘤转移性扩张的减少，具体而言血源性肿瘤转移的减少。

本发明的第二个方面提供了用于诱导肿瘤中异位或三级淋巴结的形成的方法，该方法包括将肿瘤暴露于有效量的包括LIGHT多肽和肿瘤导向肽的肽-蛋白质轭合物。

该异位或三级淋巴结可包括高内皮小静脉(HEV)。

该LIGHT多肽可包括SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:2中所示的核苷酸序列编码。

在一个示例性实施例中，该肿瘤导向肽是含有RGR的肽。该含有RGR的肽可包括氨基酸序列CRGRRSTG(SEQ ID NO:5)。在一个实施例中，该含有RGR的肽轭合在该LIGHT多肽的C-末端。该肿瘤导向肽可通过一个接头序列轭合至该LIGHT多肽。在示例性实施例中，该接头可包括一个或多个(任选两个或更多个、或三个或更多个)甘氨酸(G)残基。