[发明专利]被工程化以归巢至淋巴结B细胞区、皮肤或胃肠道的CAR‑T淋巴细胞

说明书

本申请要求2014年8月12日提交的美国临时专利申请号62/036,447的权益，所述美国临时专利申请的公开内容通过引用整体并入本文。

1.领域

本文的公开内容涉及免疫学领域，并且更具体地，涉及T淋巴细胞或其它免疫细胞的修饰。

2.背景

T淋巴细胞识别特异性抗原(包括肿瘤相关或肿瘤特异性抗原)并与之相互作用。由于T淋巴细胞能够杀灭肿瘤细胞，因此过去25年以来在用T淋巴细胞(无论是抗原特异性T淋巴细胞，还是经遗传修饰以表达一个或多个嵌合抗原受体(CAR；参见，例如，Eshhar，美国专利号7,741,465；Eshhar，美国专利申请公开号2012/0093842)的T淋巴细胞)靶向肿瘤细胞方面投入浓厚兴趣。然而，鉴于将CAR T细胞靶向身体必需区域的难度，需要寻找新的方法来增强CAR T细胞的归巢。

3.概述

本文提供了经遗传修饰的细胞，例如免疫细胞，诸如T淋巴细胞，例如人T淋巴细胞，其包含某种受体，该受体引起表达所述受体的细胞归巢至特定解剖区、特定组织或特定类型细胞，例如淋巴结的B细胞区、胃肠道或皮肤。在具体实施方案中，本文提供的经遗传修饰的细胞是T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞。在某些实施方案中，经遗传修饰的细胞表达嵌合抗原受体(CAR)。不希望受任何特定机制或理论的束缚，据信，当本文经遗传修饰的细胞表达某些受体(该受体引起表达所述受体的细胞归巢至特定区)时，它们更可能暴露于天然抗原，其中细胞(例如，表达CAR的细胞)能够被活化。

在第一个方面，本文提供包含(例如已被工程化以表达)归巢受体和CAR的细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群。在某些实施方案中，归巢受体通常不在T淋巴细胞中表达或内源性地在T淋巴细胞中表达。在某些实施方案中，归巢受体是B细胞区归巢受体。在具体实施方案中，B细胞区归巢受体是CXCR5。在更具体的实施方案中，包含归巢受体(例如B细胞区归巢受体)的细胞或细胞群，另外缺乏T细胞区归巢受体(例如CXCR7)的表达，或与正常T细胞相比具有降低的所述T细胞区归巢受体的表达，例如该细胞或细胞群被工程化以比正常T细胞更低的水平表达T细胞归巢受体。

在某些实施方案中，归巢受体是胃肠归巢受体。在具体实施方案中，胃肠归巢受体是整联蛋白α4β7(也称为淋巴细胞派伊尔结(Peyer patch)粘附分子)。在其它具体实施方案中，胃肠归巢受体是CCR9(C-C趋化因子受体类型9)。在某些实施方案中，细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，包含(例如已被工程化以表达)一种以上(例如第二)胃肠归巢受体，例如，原代T淋巴细胞包含CCR9和整联蛋白α4β7。

在一个实施方案中，包含(例如已被工程化以表达)胃肠归巢受体的细胞，例如T淋巴细胞，或此类细胞群，在维生素A代谢物存在下已被活化、扩增，或既被活化又被扩增。在具体实施方案中，维生素A代谢物是视黄酸。

在某些实施方案中，归巢受体是皮肤归巢受体。在具体实施方案中，皮肤归巢受体是CLA(皮肤淋巴细胞相关抗原受体)。在其它具体实施方案中，皮肤归巢受体是CCR4、CCR8或CCR10。在某些实施方案中，细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，包含(例如已被工程化以表达)第二皮肤归巢受体。在其它实施方案中，细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，包含(例如表达)第三皮肤归巢受体。在其它实施方案中，细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，包含(例如表达)第四皮肤归巢受体。在其它实施方案中，细胞或细胞群包含(例如表达)两种或更多种皮肤归巢受体，例如，CLA、CCR4、CCR8和/或CCR10中的两种或更多种。

在一个实施方案中，包含(例如表达)皮肤归巢受体的细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，在维生素D代谢物存在下已被活化、扩增，或既被活化又被扩增。在具体实施方案中，维生素D代谢物是1,26-二羟胆钙化醇(1,25(OH)₂D₃)。在一些实施方案中，细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，在IL-12存在下已被活化、扩增，或既被活化又被扩增。在具体实施方案中，细胞，例如T淋巴细胞，例如原代T淋巴细胞，或此类细胞群，在IL-12和维生素D代谢物二者存在下已被活化、扩增，或既被活化又被扩增。