[发明专利]使用双膦酸盐、抗CD3抗体和IL‑2扩增T细胞群体

权利要求书

1.一种用于快速扩增T细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

(i).提供包含T细胞群体的外周血单核细胞；

(ii).在包含至少一种二膦酸盐的第一培养基中孵育所述外周血单核细胞持续第一时间段，从而获得所述T细胞群体的第一阶段扩增；和

(iii).在包含α-CD3抗体和白介素-2的第二培养基中孵育所述外周血单核细胞持续第二时间段，从而获得所述T细胞群体的第二阶段扩增，其中所述第二阶段扩增为至少100倍扩增。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述T细胞的群体包含γδT细胞。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述T细胞群体由γδT细胞组成。

4.根据权利要求1所述的方法，其中外周血单核细胞从罹患恶性疾病、自身免疫病或传染病的受试者获得。

5.根据权利要求4所述的方法，所述方法还包括将步骤(iii)中获得的T细胞群体或其一部分移植到所述受试者。

6.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括在步骤(iii)之前从所述外周血单核细胞中选择和分离T细胞，并将分离的T细胞孵育在所述第二培养基中。

7.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括在步骤(iii)之后选择和分离γδT细胞。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一培养基还包含白介素-2。

9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(i)中的所述外周血单核细胞具有约0.5X10⁶至1X10⁶细胞/ml的细胞密度。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二时间段是至少10天。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种二膦酸盐选自由以下组成的组：唑来膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、利塞膦酸、伊班膦酸、英卡膦酸、依替膦酸、利塞膦酸、替鲁膦酸、其组合、其盐及其水合物。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述至少一种二膦酸盐是唑来膦酸。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二培养基还包含被辐照的外周血单核细胞。

14.根据权利要求6所述的方法，其中所述T细胞群体的所述第二阶段扩增为至少200倍扩增。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述T细胞群体的所述第一阶段扩增为至少100倍扩增。

16.一种药物组合物，包含通过根据权利要求1所述的方法获得的所述T细胞群体。

17.根据权利要求16所述的药物组合物，所述药物组合物还包含至少一种药学上可接受的载体或稀释剂。

18.一种在有其需要的受试者中治疗传染性、自身免疫性或恶性疾病或病症的方法，包括：

(i)从受试者获得包含T细胞群体的外周血单核细胞；

(ii)在包含至少一种二膦酸盐的第一培养基中孵育所述外周血单核细胞持续第一时间段，从而获得所述T细胞群体的第一阶段扩增；

(iii)在包含α-CD3抗体和IL-2的第二培养基中孵育所述外周血单核细胞持续第二时间段，从而获得所述T细胞群体的第二阶段扩增，其中所述第二阶段扩增为至少100倍扩增；和

(iv)向所述受试者施用所述细胞或其一部分。

19.根据权利要求18所述的方法，所述方法还包括在步骤(iii)之前从所述外周血单核细胞中选择和分离T细胞，并将分离的T细胞孵育在所述第二培养基中。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述T细胞的群体包含γδT细胞。

21.根据权利要求19所述的方法，其中所述T细胞群体由γδT细胞组成。

22.根据权利要求18所述的方法，所述方法还包括多重复步骤(iv)至少一次。

23.根据权利要求16所述的药物组合物用于在有其需要的受试者中治疗传染性、自身免疫性或恶性疾病或病症的用途。