[发明专利]用于细胞分离的微流体方法和盒

权利要求书

1.一种用于识别、或者用于识别以及选择在其表面上展示所关注蛋白质的细胞的方法，其包括：

（a）提供包含所述细胞的样品；

（b）提供包含一个或多个亲和基团的官能化超顺磁珠形式的捕获珠，以及非官能化铁磁珠形式的载体珠，其中所述亲和基团适用于结合在其表面上展示所述蛋白质的细胞；

（c）在反应室中将所述细胞与所述捕获珠和所述载体珠混合，

其中所述捕获珠的所述亲和基团结合在其表面上展示所述蛋白质的细胞，从而生产具有磁性标记的磁性标记细胞（MLC），

将具有振幅和极性的外部磁场施加于所述反应室，其中在所述外部磁场中，通过所述载体珠促进捕获珠与展示所述蛋白质的细胞的混合，

（d）在至少一个洗涤步骤中，将非磁性标记的细胞与所述磁性标记细胞分离；以及

（e）识别、或者识别以及选择在其表面上展示所述蛋白质的细胞。

2.权利要求1所述的方法，其中所述所关注蛋白质为标志物蛋白或转基因表达产物（TEP）。

3.权利要求2所述的方法，其中，所述标志物蛋白为识别干细胞的标志物蛋白。

4.权利要求1所述的方法，其中所述细胞为重组细胞，并且所述样品包含使用转基因转染的所述重组细胞，其中所述所关注蛋白质为转基因表达产物（TEP）；并且其中所述磁性标记细胞在与所述亲和基团结合后在一定的时间间隔内失去其磁性标记，并且其中基于所述时间间隔识别、或者识别以及选择细胞。

5.权利要求4所述的方法，其中基于所述时间间隔，将分泌转基因表达产物的重组细胞与展示但不分泌转基因表达产物的重组细胞分离。

6.根据权利要求2至3的任意一项所述的方法，其中选择结合后在少于1小时内失去磁性标记的细胞。

7.根据权利要求2至3的任意一项所述的方法，其中选择结合后在少于24小时内失去磁性标记的细胞。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述捕获珠与所述载体珠的比例为2:1至50:1。

9.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括改变所述振幅和/或所述极性，从而限定连续的操作模式，其中（c）中的所述混合是以混合模式实施的，并且（d）中所述分离是以珠分离模式实施的。

10.权利要求9所述的方法，其中所述细胞为重组细胞，并且其中所述在其表面上展示的蛋白质为转基因表达产物，并且其中（e）中的所述识别是通过从反应室洗脱所述细胞来实施的，其中所述细胞结合后在少于48小时内失去其磁珠。

11.权利要求9或10所述的方法，其中在所述混合和珠分离模式中，所述磁场是在1 Hz-1000Hz和0.1至10000mA下以循环或交替模式施加的。

12.权利要求9或10所述的方法，其中所述混合模式和/或珠分离模式均持续不到60秒。