[发明专利]包含含有单磷酰脂质A（MPLA）的脂质体组合物和皂苷的无毒佐剂制剂

说明书

本文提供的是包含含有单磷酰脂质A（MPLA）的脂质体组合物与皂苷（例如QS‑21）的佐剂制剂，其中所述脂质体组合物包含i）包含磷脂的脂质双层，其中烃链具有在水中≥23℃的熔融温度，和ii）以大于约50%（摩尔/摩尔）、优选约55%至约71%（摩尔/摩尔）、或更优选约55%（摩尔/摩尔）的摩尔百分比浓度的胆固醇。佐剂制剂展示脂质A或皂苷的最低限度毒性。

与相关申请的交叉参考

本申请要求享有于2014年3月25日提交的美国临时申请号61/970,118的利益，所述美国临时申请以其整体并入本文。

美国政府权利

在本公开内容的实施方案的开发期间执行的部分工作利用了通过美国国防部拨款号（United States Department of Defense Grant No.）W81XWH-07-2-0067的美国政府基金。美国政府在本发明中拥有一定权利。

领域

本文描述的涉及包含含有单磷酰脂质A（MPLA）的脂质体和至少一种皂苷例如QS-21的组合物。脂质体包含i）包含磷脂的脂质双层，其中烃链具有在水中≥ 23℃的熔融温度（melting temperature），和ii）以大于约50%（摩尔/摩尔）的摩尔百分比浓度的胆固醇。

背景

许多现代疫苗的最佳有利效应要求使用疫苗佐剂，其在注射后增强免疫应答，同时维持全身性安全和最低限度的副反应。脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌的外膜的外小叶中的主要表面分子，并且专一地在革兰氏阴性菌的外膜的外小叶中出现。LPS阻碍通过血清补体和吞噬细胞的细菌破坏，并且涉及用于定植的粘附。LPS是一组大约10,000道尔顿的结构上相关的复杂分子，其含有其为LPS最内部区域的脂质A，所述脂质A充当疏水锚且包含携带长链脂肪酸的磷酸化葡糖胺二糖单位。

LPS的生物活性例如致死毒性、致热原性和佐剂性已显示与脂质A部分相关。LPS和脂质A两者长久以来均因其强佐剂效应而已知，但这些分子的高毒性已限制其在疫苗制剂中的使用。显著的科学努力已朝向减少LPS或脂质A的毒性同时维持其佐剂性发生。

其他常用的非人佐剂是皂皮树属（Quillaja）皂苷，其是从皂树（Quillaja saponaria）的树皮中提取的两亲三萜糖苷的混合物。粗皂苷已用作兽医学佐剂。Quil‐A是皂皮树属皂苷材料的部分纯化的水提取物，并且QS-21是Quil A的HPLC纯化级分。产生QS-21（称为QA21）的方法公开于美国专利号5,057,540中。然而，使用皂苷例如QS-21的主要副作用之一是其细胞毒性。具体地，尽管确切细胞毒性机制目前未知，但皂苷引起溶血，这是红血细胞的破裂或裂解。

需要的是疫苗递送组合物，其包括用于支持免疫应答的佐剂，但不含相关细胞毒性。

概述

相应地，本领域存在开发更有力同时更安全的佐剂制剂的需要。本文提供的是包含含有单磷酰脂质A（MPLA）的脂质体（L（MPLA））组合物和皂苷的佐剂制剂，其中所述佐剂制剂展示脂质A或皂苷的最低限度毒性。

相应地，提供的是包含含有单磷酰脂质A（MPLA）的脂质体组合物和至少一种皂苷的佐剂制剂，其中所述脂质体组合物包含i）包含磷脂的脂质双层，其中烃链具有在水中≥23℃的熔融温度，和ii）以大于约50%（摩尔/摩尔）的摩尔百分比浓度的胆固醇。皂苷可以选自QS-7、QS-18、QS-21或其混合物。优选地，皂苷可以是QS-21。