[发明专利]一种甲氧苄啶半抗原及其胶体金检测装置及其制备方法

权利要求书

1.一种甲氧苄啶半抗原，其特征在于：其具有式(1)所示的化学结构式：

2.根据权利要求1所述的甲氧苄啶半抗原，其特征在于，采用以下步骤制备得到：

步骤S1：在甲氧苄啶中加入氢溴酸，于90～110℃下反应2～4h，然后加入氢氧化钠溶液淬灭，冷却析出晶体后，将晶体溶解于沸水中，调节pH值至中性，重结晶提纯；

步骤S2：取步骤S1中提纯的晶体溶于DMF中，加入碳酸钾及溴丙酸，35～45℃下反应4～8小时，采用乙酸乙酯萃取过柱提纯得所述甲氧苄啶半抗原。

3.根据权利要求2所述的甲氧苄啶半抗原，其特征在于：所述甲氧苄啶与氢溴酸的摩尔比为1：3～12。

4.一种甲氧苄啶免疫抗原，其特征在于：采用权利要求1～3任意一项所述的甲氧苄啶半抗原制备得到，将所述甲氧苄啶半抗原与DCC、NHS混合，于4℃下搅拌，离心后取上清液；将人血清蛋白溶于pH值为8.0的PBS溶液中，加入DMF后搅拌，然后将所述上清液逐渐加入其中，4℃下反应12h，离心后，取上清液，透析纯化，得到所述甲氧苄啶免疫抗原。

5.一种甲氧苄啶胶体金检测装置，其特征在于：包括反应杯和检测试纸，所述检测试纸包括底板，以及底板上依次铺设的样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述反应杯里含有胶体金标记的甲氧苄啶单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和控制线，所述检测线为采用权利要求4所述的甲氧苄啶免疫抗原在硝酸纤维素膜上进行喷涂制得；其中，所述甲氧苄啶单克隆抗体为采用权利要求4所述的甲氧苄啶免疫抗原与免疫Balb/c小鼠经细胞融合，筛选得到分泌甲氧苄啶单克隆抗体的杂交瘤细胞，用获得的杂交瘤细胞采用体内诱生腹水法制备得到。

6.根据权利要求5所述的甲氧苄啶胶体金检测装置，其特征在于：所述控制线为采用兔抗鼠IgG进行喷涂制得，所述检测线和控制线相互平行。

7.权利要求5或6所述的甲氧苄啶胶体金检测装置的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：

步骤A：在甲氧苄啶中加入氢溴酸，于90～110℃下反应2～4h，然后加入氢氧化钠溶液淬灭，冷却析出晶体后，将晶体溶解于沸水中，调节pH值至中性，重结晶提纯；将提纯的晶体溶于DMF中，加入碳酸钾及溴丙酸，35～45℃下反应4～8小时，采用乙酸乙酯萃取过柱提纯得所述甲氧苄啶半抗原；利用碳二亚胺法将所述甲氧苄啶半抗原与载体人血清蛋白偶联，制备得到甲氧苄啶免疫抗原；

步骤B：将所述甲氧苄啶免疫抗原与免疫Balb/c小鼠经细胞融合，筛选得到分泌甲氧苄啶单克隆抗体的杂交瘤细胞，用获得的细胞诱导小鼠产生腹水，纯化后获得甲氧苄啶单克隆抗体；

步骤C：用柠檬酸三钠与氯金酸反应制备胶体金；将胶体金与所述甲氧苄啶单克隆抗体混合形成金标抗体，离心复溶后得到胶体金标记的甲氧苄啶单克隆抗体；

步骤D：将步骤C得到的胶体金标记的甲氧苄啶单克隆抗体分装至反应杯中，低温干燥；将所述甲氧苄啶免疫抗原在硝酸纤维素膜上进行喷涂制得检测线，将兔抗鼠IgG在硝酸纤维素膜上进行喷涂制得控制线；

步骤E：沿同一方向依次铺设的样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸并粘附在底板上，组装得到所述检测试纸。

8.权利要求7所述的甲氧苄啶胶体金检测装置的制备方法，其特征在于：还包括将粘好的所述检测试纸切成等宽度的试纸条，将所述反应杯及试纸条密封干燥保存。