[发明专利]一种简便的SDS裂解制备细菌基因组DNA悬液的方法及应用在审
| 申请号： | 201511005071.1 | 申请日： | 2015-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN105400774A | 公开（公告）日： | 2016-03-16 |
| 发明（设计）人： | 廖振林;方祥;李汉荣;王丽;钟青萍 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人： | 杨晓松 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 简便 sds 裂解 制备 细菌 基因组 dna 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种简便的SDS裂解制备细菌基因组DNA悬液的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)细菌培养：用试管装入已灭菌的液体培养基1000mL，接种细菌，经过夜培养12～16小时；
(2)菌体收集：吸取1000μL细菌悬液12000rpm离心1分钟沉淀菌体，并去除上清液；
(3)菌体的裂解：往菌体沉淀加入10μL0.1-10％的SDS溶液，混匀后用涡旋振荡器震荡5分钟；
(4)稀释裂解液：加入490μL的无菌水或者1×TE溶液，吹打混匀，稍作离心，即可获得细菌基因组DNA悬液。
2.根据权利要求1所述的简便的SDS裂解制备细菌基因组DNA悬液的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的细菌为兼性厌氧菌或好氧细菌。
3.根据权利要求1所述的简便的SDS裂解制备细菌基因组DNA悬液的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的细菌为兼性厌氧菌时，采用静置培养；所述的细菌为好氧细菌时，摇床培养。
4.权利要求1～3任一项所述的方法制备获得的细菌基因组DNA悬液直接用于PCR的细菌DNA模板。
5.根据权利要求4所述的方法制备获得的细菌基因组DNA悬液直接用于PCR的细菌DNA模板，其特征在于：每25μLPCR体系直接加入1～1.5μL细菌基因组DNA悬液作为反应模板。
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