[发明专利]一种枸橼酸西地那非有关物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种化学药物枸橼酸西地那非及其制剂的有关物质检测方法，属于药物分析领域。

背景技术

枸橼酸西地那非是一种有效治疗主观和客观原因引起的阴茎勃起功能障碍病症的药物，是选择性磷酸二酯酶5型(PDE-5)的抑制剂，1997年3月经FDA批准作为处方药在美国上市。枸橼酸西地那非的化学结构式如下：

阴茎勃起功能障碍的主要原因是阴茎海绵体供血不足，可能与缺少一氧化氮有关。NO可使鸟苷酸环化酶(GC)活化，在活化的GC作用下，鸟苷酸(GTP)转变成环鸟苷酸(cGMP)；cGMP可被磷酸二脂酶5型(PDE-5)降解为cGMP-5′，后者无生物学效应，而cGMP则可引起阴茎海绵体平滑肌血管舒张，使阴茎迅速充血而勃起。研究表明，枸橼酸西地那非可通过抑制海绵体内分解cGMP的PDE-5，来增强NO的作用，从而发挥其治疗作用。

药品中的有关物质是指药品中除主要成分之外的其他物质，它既可能是按既定工艺生产过程中带入的其他原料、试剂及生产过程中产生的中间体、副产物和立体异构体等，也可能是在正常贮存和运输过程中，由于环境条件的影响而产生的降解产物、聚合物等。药物中含有的有关物质不但会降低药物疗效，还与人们的健康和生命安危有极其密切的关系。药物安全性评价的一个重要内容就是药物中有关物质的含量控制。

为了严格控制枸橼酸西地那非原料药及其制剂的质量，保证临床用药的安全有效，需要建立其有关物质的检测方法。然而，枸橼酸西地那非合成路线较多，不同生产路线及制剂工艺所带来的有关物质也不完全相同。常见的有关物质有以下7种(有关物质A～G)，具体名称和结构见下表。

如何在同一色谱条件下对上表中的7种有关物质进行同时检测与分析，是枸橼酸西地那非原料药及其制剂产品质量控制中的一个重要问题。

现有技术中，USP35及EP8.0对上表中枸橼酸西地那非中的有关物质D、E、G，以及1-咪唑和5-[2-羟基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]-苯基]-1-甲基-3-丙基-1,6-二氢-7H-吡唑并-[4,3-d]嘧啶-7酮，共5个有关物质进行了质量控制。色谱条件为：采用C18色谱柱；流动相为水相(0.7％三乙胺的水溶液，用磷酸调pH至3.0)：甲醇：乙腈＝58:25:17；洗脱方式为等度洗脱。而采用该方法对上表中7个有关物质A～G进行分析检测时，有关物质C与E重合，有关物质D与F重合，专属性差，有关物质A出峰时间太早，主成分峰的理论塔板数低，仅为1441。

文献(AnalyticalSciences,2003,19,1007～1011.)报道了对上表中枸橼酸西地那非的有关物质A，以及5-(5-氯-2-乙氧基)-1-甲基-3-丙基-6,7-1H--吡唑并[4,3-d]嘧啶-7酮、1-甲基-4-硝基-3-丙基吡唑-5-羧酸、1-甲基-4-硝基-3-丙基咪唑-5-甲酰胺和5-(2-乙氧基)-1-甲基-3-丙基-6,7-二氢-1H-吡唑并-[4,3-d]嘧啶-7-酮，共5个有关物质进行质量分析的方法。色谱条件为：采用C18色谱柱；流动相为含0.05mol/ml磷酸二氢钾的水溶液：乙腈＝30:70；洗脱方式为等度洗脱。而采用该方法对上表中7个有关物质A～G进行检测时，有关物质A与E重合，有关物质B未检出，专属性差，主成分峰理论塔板数低，仅为1477。

文献(InternationalJournalofComprehensivePharmacy,2011,7,1～6.)报道了一种枸橼酸西地那非有关物质的检测方法。该方法采用C18色谱柱；流动相为水相(含0.05mol/ml磷酸二氢钾的水溶液，用氢氧化钾溶液调pH至5.8)：乙腈：甲醇＝30:50:20，洗脱方式为等度洗脱。采用该方法对上表中7个有关物质A～G进行分析检测时，有关物质A与有关物质D重合，专属性差。

文献(中国药科大学学报,2001,32,429～431.)对枸橼酸西地那非的4个中间体的分离检测进行了研究。该方法采用C18色谱柱；流动相为水相(0.015mol/ml三乙胺的水溶液，用磷酸调pH至6.0)：乙腈＝42:58，洗脱方式为等度洗脱。采用该方法对上表中7个有关物质A～G进行分析检测时，有关物质D未检出，有关物质A、E分离度不好，理论塔板数低。

综上所述，现有方法均不能同时检测上表中枸橼酸西地那非的7个有关物质，且色谱条件中的流动相含有不挥发性盐或三乙胺，不能用于液质联用分析，影响后续研究工作的开展。