[发明专利]一种自生固氮菌MBC1及其应用

权利要求书

1.一种自生固氮菌(Pseudomonas cannabina)MBC1，其保藏号为CGMCC No.10817，保藏日期为2015年5月19日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.含有权利要求1所述自生固氮菌MBC1的菌剂。

3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂中还含有菌体吸附材料，所述菌体吸附材料选自草炭、珍珠岩、蛭石粉和微粉碳酸钙中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述菌体吸附材料为草炭。

5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于，在所述菌剂中，自生固氮菌MBC1的含量为2.1×10⁸-2.9×10⁸cfu/g。

6.根据权利要求5所述的菌剂，其特征在于，在所述菌剂中，自生固氮菌MBC1的含量为2.9×10⁸cfu/g。

7.根据权利要求2-6中任意一项所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的pH值为6.8-7.2。

8.权利要求2所述的菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将所述自生固氮菌MBC1接种于一级斜面培养基中，在28-30℃培养3-5天，获得一级菌株；将所述一级菌株接种于二级液体培养基中，在28-30℃条件下震荡培养2-3天，获得二级菌株；将所述二级菌株接种于三级固体培养基中，在28-30℃条件下培养在1-2天后获得三级菌株；将所述三级菌株与菌体吸附材料按照菌剂中自生固氮菌MBC1的含量为2.1×10⁸-2.9×10⁸cfu/g的配比混匀后获得菌剂；

其中，所述一级斜面培养基的配方为：KH₂PO₄ 0.2g/L，MgSO₄ 0.2g/L，NaCl 0.2g，CaCO₃5.0g，甘露醇10.0g，CaSO₄ 0.1g，pH 7.0，琼脂20g，蒸馏水1000mL；

二级液体培养基的配方为：KH₂PO₄ 0.2g/L，MgSO₄ 0.2g/L，NaCl 0.2g，CaCO₃ 5.0g，甘露醇10.0g，CaSO₄ 0.1g，pH 7.0，蒸馏水1000mL；

三级固体培养基的配方为：甘露醇10.0g，酵母粉1.0g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，K₂HPO₄ 0.5g，NaCl 0.1g，CaCl₂ 0.05g，Rh微量元素液4.0mL，琼脂20g，H₂O 1000mL，pH 6.8-7.0。

9.权利要求1所述的自生固氮菌MBC1或权利要求2-7中任意一项所述的菌剂在土壤改良中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，包括将所述菌剂和砂土按质量比1：9-11混合均匀后施用于土壤表面。

11.根据权利要求9或10所述的应用，其特征在于，所述菌剂的用量为420-560g菌剂/亩。