[发明专利]一种聚酰胺-胺超支化基因载体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201510770230.0 | 申请日: | 2015-11-12 |
公开(公告)号: | CN105420277B | 公开(公告)日: | 2020-11-06 |
发明(设计)人: | 邓维;张薇;刘梦艳;洪诗斌;姚子健;张建勇;周龙 | 申请(专利权)人: | 上海大学;上海应用技术学院 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C08G83/00;A61K48/00;A61P35/00 |
代理公司: | 合肥市长远专利代理事务所(普通合伙) 34119 | 代理人: | 程笃庆;黄乐瑜 |
地址: | 200444 上海市宝山区上大路*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 聚酰胺 超支 基因 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种聚酰胺-胺超支化基因载体,其特征在于,其原料包括A物料、B物料、C物料及三乙胺;
A物料由乙二胺、三乙四胺及分子量为250-300的多乙烯多胺的一种或两种以上组成,B物料为N,N′-亚甲基双丙烯酰胺,C物料为L-半胱氨酸甲酯盐酸盐;
N,N′-亚甲基双丙烯酰胺与L-半胱氨酸甲酯盐酸盐的摩尔比为2-4:1-3,N,N′-亚甲基双丙烯酰胺与A物料的摩尔比1:80-120;
制备该聚酰胺-胺超支化基因载体的方法具体包括:将B物料、C物料、三乙胺及溶剂送入反应器进行聚合反应,具体包括:称取40-60wt%DMSO,向其中加入B物料溶解完全得到第一溶液,将水与剩余的DMSO混合均匀,向其中加入C物料溶解完全,加入环糊精至饱和得到第二溶液,将第一溶液滴加至第二溶液中,滴加完全后加入三乙胺,升温至52-62℃反应32-38h,加入A物料进行氨解,氨解温度为50-60℃,氨解时间为36小时,得到聚酰胺-胺超支化基因载体,其中所述溶剂按体积份包括水1-6份,DMSO 0-5份,B物料与溶剂的重量体积比g:ml为0.2-0.8:4-8。
2.根据权利要求1所述的聚酰胺-胺超支化基因载体,其特征在于,其原料还包括环糊精、水及DMSO,水与DMSO的体积比为2-12:1-10。
3.根据权利要求2所述的聚酰胺-胺超支化基因载体,其特征在于,水与DMSO的混合物与B物料的体积重量比ml:g为4-8:0.2-0.8。
4.根据权利要求1所述的聚酰胺-胺超支化基因载体,其特征在于,透析使用的透析膜的分子量为3000-14000。
5.根据权利要求1或4所述的聚酰胺-胺超支化基因载体的制备方法,其特征在于,氨解反应后,还包括浓缩,纯化。
6.根据权利要求5所述的聚酰胺-胺超支化基因载体的制备方法,其特征在于,浓缩过程在旋转蒸发仪中进行;在纯化过程中,向浓缩得到的物料中加入冷丙酮和/或醚进行沉淀,过滤,向得到的沉淀物中加入蒸馏水溶解,继续加入冷丙酮和/或醚进行沉淀,依次重复3-5次。
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