[发明专利]一种山楂叶提取原花青素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物加工科学领域，特别是一种山楂叶提取原花青素的制备方法。

背景技术

原花青素(Procyanidins，简称OPC)又被称为低聚黄烷酮类，是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。

原花青素是自然界酚类化合物中最丰富的种类，原花青素因在酸介质下发生典型氧化降解反应产生有色的花青素而得名。在各类原花青素中二聚体是分布最广、研究最多的一类原花青素。国内外已经报道了很多关于原花青素的药理学作用，例如清除自由基、强抗氧化性、抗肿瘤以及抗动脉硬化等功能；原花青素也已经用来防止糖尿病患者白内障手术后的并发症；此外原花青素在植物防御捕食者和微生物机理方面也起到了重要作用。鉴于原花青素具有如此广泛的作用，其提取方法也受到了国内外研究人员的极大关注。

山楂叶为蔷薇科山楂属植物山楂的叶子,其主要活性成分为黄酮类化合物。现代药理学研究证明,山楂叶总黄酮在降血压、调血脂和增大心脏血流量等方面疗效显著。近年来,人们对山楂叶黄酮的抗氧化活性也有了较深入的研究，研究表明:山楂叶含有抗氧化物质,其乙酸乙酯提取物抗氧化效果最好,柠檬酸对它有较好的增效作用。鉴于山楂叶黄酮具有良好的抗氧化活性,国外有学者已经对山楂花和叶中低聚原花青素进行分离鉴定，而目前国内有关山楂叶原花青素的研究报道鲜见报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有提取方法的不足，提出一种山楂叶提取原花青素的制备方法。此方法所得到的原花青素产品可用于医药保健及化妆品等行业。

本发明的一种山楂叶提取原花青素的制备方法，原料为山楂叶，试剂有果胶酶(30000IU)，纤维素酶(15000IU)，95%乙醇（食品级），柠檬酸（食品级），磷酸氢二钠（食品级）。

本发明的一种山楂叶提取原花青素的制备方法，由以下步骤组成：

(1)备料：将山楂叶进行恒温减压干燥，粉碎称量后，40目过筛，得到原料干粉备用；

(2)配制缓冲溶液：将0.1mol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1：1.5～2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液：

(3)配制酶液：混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按原料干粉重量(kg)：缓冲溶液体积(L)=1：15～30的比例计算果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1～0:3g果胶酶与0.1～0.3g纤维素酶；

(4)投料：按原料干粉重量(kg)：缓冲溶液体积(L)=1：15～30的比例，将原料干粉加入酶液中；

(5)酶解：将原料干粉与酶液搅拌均匀后，在50～55℃的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3-4h，生成酶解液和残渣的混合物；

(6)提取：按每kg原料干粉加入15～30L的75～95%乙醇的方法，将75～95%乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在60～65℃条件下提取2～3h，经过滤，得到提取液；

(7)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重，得到原花青素。

本发明的一种山楂叶提取原花青素的制备方法，以山楂叶为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取原花青素，其优点是原青花素产品安全性好、质量佳，原青花素提取率较醇提取法高30～40%，酶制剂的用量少，而且工艺简单，操作方便，效率高，适合工业化生产。使用果胶酶和纤维素酶可以破坏植物原料中以纤维素为主的细胞壁结构及其细胞间相连的果胶物质，使提取传质阻力减小，使内容物原青花素成分易于溶出。乙醇溶液作为醇溶性原青花素的提取溶剂。柠檬酸·磷酸缓冲溶液起到调节溶液pH值的作用。按本发明的方法配制的缓冲溶液，经检测其pH=6，可以保证酶制剂作用的最佳效果。

具体实施例：为了充分公开本发明的一种山楂叶提取原花青素的制备方法，下面结合实施例加以说明。

实施例：一种山楂叶提取原花青素的制备方法，其方法包括以下步骤：

(l)置新鲜的山楂叶于65℃烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40日过筛，得到原料干粉备用。

(2)取0.1mol/L柠檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液。