[发明专利]蛋白质或胜肽的印刷方法、及蛋白质或胜肽阵列、功能性蛋白质或功能性胜肽的鉴定方法

说明书

本专利申请是申请号为201180041500.4的名称为“蛋白质或胜肽的印刷方法、及蛋白质阵列或胜肽阵列、以及功能性蛋白质或功能性胜肽的鉴定方法”的发明专利申请的分案申请，原申请的申请日是2011年08月25日。

技术领域

本发明是有关于一种蛋白质或胜肽的印刷方法、及通过该等方法所制造的阵列、以及使用该阵列的功能性蛋白质或功能性胜肽的鉴定方法。本申请基于2010年8月27日在日本提出申请的日本特愿2010-191060号、及2010年11月18日在日本提出申请的日本特愿2010-258302号而要求优先权，并将其内容引用至本文中

背景技术

近年来，向基板上的分子图案化方法被应用于生物芯片或生物传感器等各种生物学用途。

尤其是可实现次微米级的大面积图案化的微接触印刷法(以下，称为μCP法)受到瞩目。μCP法由于无需光刻图案化(photolithographicpatterning)所必需的强酸或强碱，所以适用于蛋白质或其它生物体分子的图案化。

然而，蛋白质或其它生物体分子容易发生变性或分解，因而对于所述μCP法正进行各种改良(例如非专利文献1)。

非专利文献1中所提出的方法是对用于印刷的硅橡胶进行低温等离子处理，而增加硅橡胶表面的亲水性。由此，蛋白质等生物体分子的变性等得以被抑制。

[现有技术文献]

[非专利文献]

[非专利文献1]James等人、Langmuir、第14卷、第741～744页、1998年

发明内容

[发明所要解决的问题]

然而，非专利文献1中所提出的方法是利用凸版印刷技术的方法，是直接印刷蛋白质等生物体分子的方法，因而用作墨水的该蛋白质容易干燥，例如对将保存稳定性低的蛋白质进行印刷的方法而言，尚有改良的余地。

本发明是鉴于所述情况研究而成的，其目的在于提供一种可降低对保存稳定性低的蛋白质或胜肽的损害且将所述蛋白质或胜肽印刷为任意形状的蛋白质或胜肽的印刷方法、及通过该等方法所制造的阵列、以及使用该阵列的功能性蛋白质或功能性胜肽的鉴定方法。

[解决问题的技术手段]

本发明者等人为了解决所述问题而进行了努力研究，结果发现：通过应用凹版印刷(intaglioprinting)技术，可解决所述问题。

即，本发明的一个实施方式是提供下述(1)至(12)。

(1)本发明的一个实施方式的蛋白质或胜肽的印刷方法的特征在于包括具有步骤：(a)于由具有特定开口形状的微小凹部构成的微凹版中，于所述微小凹部内准备核酸与无细胞蛋白质合成系统的步骤；(b)以与在所述微小凹部中合成的下述蛋白质或胜肽相接触的方式将基板与所述微凹版重迭的步骤；(c)于所述微小凹部内，使用所述无细胞蛋白质合成系统，由所述核酸来合成蛋白质或胜肽，并将所述蛋白质或胜肽沿着所述微小凹部所具有的特定的开口形状固定在所述基板上的步骤。

(2)本发明的一个实施方式的蛋白质或胜肽的印刷方法优选为所述蛋白质或所述胜肽含有作为固相结合部位的氨基酸序列，所述基板具有对所述氨基酸序列具有亲和性的固相结合部位识别部位。

(3)本发明的一个实施方式的蛋白质或胜肽的印刷方法优选为所述固相结合部位识别部位为镍离子或钴离子。

(4)本发明的一个实施方式的蛋白质或胜肽的印刷方法优选为所述氨基酸序列为聚组胺酸。

(5)本发明的一个实施方式的蛋白质或胜肽的印刷方法的特征在于具有如下步骤：(a)于由具有特定开口形状的微小凹部构成的微凹版中，于所述微小凹部内准备核酸、生物素化嘌呤霉素衍生物及无细胞蛋白质合成系统的步骤；(b)以与在所述微小凹部中合成的下述蛋白质或胜肽相接触的方式将经抗生物素蛋白修饰的基板与所述微凹版重迭的步骤；(c)于所述微小凹部内，使用所述无细胞蛋白质合成系统，由所述核酸来合成蛋白质或胜肽，并将所述蛋白质或胜肽沿着所述微小凹部所具有的特定开口形状固定在所述基板上的步骤。

(6)本发明的实施方式的蛋白质或胜肽的印刷方法优选为所述生物素化嘌呤霉素衍生物为以下述通式(1)表示的化合物，

[式中，Z为以下述式(2)、(3)、或(4)表示的基]

[式中，X¹及X²中的至少一个为以下述式(5)表示的基，另一个为荧光基或氢原子；﹡表示键合部位]

[式中，﹡表示键合部位]。