[发明专利]蛋白质或胜肽的印刷方法、及蛋白质或胜肽阵列、功能性蛋白质或功能性胜肽的鉴定方法在审
| 申请号: | 201510626865.3 | 申请日: | 2011-08-25 |
| 公开(公告)号: | CN105418764A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 |
| 发明(设计)人: | 一木隆范;马尼许毕亚尼;塩野博文 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人东京大学;株式会社尼康 |
| 主分类号: | C07K17/14 | 分类号: | C07K17/14;C12P21/02;C40B50/06;C40B40/06;C40B40/10;G01N33/68 |
| 代理公司: | 北京中原华和知识产权代理有限责任公司 11019 | 代理人: | 寿宁 |
| 地址: | 日本东京*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 蛋白质 印刷 方法 阵列 功能 性胜肽 鉴定 | ||
1.一种蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于具有如下步骤:
(a)将微凹版与基板重迭的步骤,所述微凹版是由微小凹部构成,于所述微小凹部内具有核酸与无细胞蛋白质合成系统;
(b)在所述微小凹部内,根据所述核酸,进行转录反应与蛋白质或胜肽合成反应;
(c)将在所述微小凹部内合成的所述蛋白质或胜肽固定在所述基板上。
2.根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述蛋白质或胜肽含有作为固相结合部位的氨基酸序列,所述基板具有对所述氨基酸序列具有亲和性的固相结合部位识别部位。
3.根据权利要求2所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述固相结合部位识别部位为镍离子或钴离子。
4.根据权利要求2所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述氨基酸序列为聚组胺酸。
5.根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,
于所述步骤(a)中,在所述微小凹部内,进一步具有生物素化嘌呤霉素衍生物,且使用经抗生物素蛋白修饰的基板。
6.根据权利要求5所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述生物素化嘌呤霉素衍生物为以下述通式(1)表示的化合物,
[式中,Z为以下述式(2)、(3)、或(4)表示的基]
[式中,X1及X2中的至少一个为以下述式(5)表示的基,另一个为荧光基或氢原子;﹡表示键合部位]
[式中,﹡表示键合部位]。
7.根据权利要求6所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,Z为以所述式(2)表示的基。
8.根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述无细胞蛋白质合成系统仅由经独立纯化的蛋白质合成所必需的因子来构成。
9.根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述核酸为被固定于固相的核酸。
10.根据权利要求9所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述核酸为经固相结合部位修饰的DNA,并且是利用经固相结合部位识别部位修饰的磁珠进行固定化的核酸。
11.根据权利要求10所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述核酸为经生物素修饰的DNA,并且是利用经链霉亲和素修饰的磁珠进行固定化的核酸。
12.根据权利要求10所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,在所述微凹版所使用的基板材料下铺设磁性体板。
13.根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述微凹版具有多个微小凹部。
14.根据权利要求13所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述多个微小凹部含有不同种类的核酸。
15.根据权利要求14所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,在所述步骤(a)中,使含有第1之核酸被固定的固相与第2之DNA被固定的固相的悬浮液与所述微凹版接触,将所述第1之核酸被固定的固相配置于所述多个微小凹部中的第1微小凹部内,将所述第2之DNA被固定的固相配置于第2微小凹部内。
16.根据权利要求9所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述固相固定有多个1种核酸。
17.根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法,其特征在于,所述核酸为源自于变异DNA数据库的DNA。
18.一种蛋白质阵列或胜肽阵列,其特征在于:其是使用根据权利要求1所述的蛋白质或胜肽的印刷方法来制得。
19.一种功能性蛋白质或功能性胜肽的鉴定方法,其特征在于:其是使用根据权利要求18所述的蛋白质阵列或胜肽阵列进行功能性筛选,并使用与该蛋白质或胜肽对应的微小凹部内的核酸来鉴定通过所述功能性筛选而确定的被固定在基板上的蛋白质或胜肽。
20.一种蛋白质阵列或胜肽阵列的制造方法,其特征在于:其是使用根据权利要求1所述的印刷方法。
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