[发明专利]用于检测甘草属植物的SSR分子标记引物有效
| 申请号: | 201510569637.7 | 申请日: | 2015-09-10 |
| 公开(公告)号: | CN105063041B | 公开(公告)日: | 2018-11-27 |
| 发明(设计)人: | 刘亚令;宋美玲;张鹏飞 | 申请(专利权)人: | 山西农业大学 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司: | 太原华弈知识产权代理事务所 14108 | 代理人: | 李毅 |
| 地址: | 030801 山西省晋*** | 国省代码: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 检测 甘草 植物 ssr 分子 标记 引物 | ||
1.用于检测甘草属植物的SSR分子标记引物G001,由核苷酸序列如SEQ.ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ.ID NO.2所示的下游引物组成。
2.权利要求1所述SSR分子标记引物G001在鉴别甘草和刺果甘草物种中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征是甘草在分子量191-327bp范围内出现DNA扩增条带,刺果甘草在分子量171-185bp范围内出现DNA扩增条带。
4.利用权利要求1所述SSR分子标记引物G001鉴别甘草和刺果甘草物种的方法,包括:
1) 利用CTAB法提取待鉴定样本叶片的总DNA;
2) 以待鉴定样本叶片的总DNA为模板,用权利要求1所述的SSR分子标记引物进行PCR扩增;PCR扩增采用10μL SSR-PCR反应体系:PCR-Mix 4.5μL,DNA模板1μL,上下游引物各0.5μL,双蒸水3.5μL;SSR-PCR反应程序:94℃预变性3min,94℃变性40s,58℃退火30s,72℃延伸60s,循环35次,72℃延伸5min;
3) 取扩增产物进行电泳,读取扩增出的引物片段大小;
4) 甘草物种在分子量191-327bp范围内出现DNA扩增条带,刺果甘草物种在分子量171-185bp范围内出现DNA扩增条带,据此实现对甘草物种和刺果甘草物种的鉴别。
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