[发明专利]一种毒沟褶菌的DNA条形码标准基因及其应用

权利要求书

1.一种毒沟褶菌的DNA条形码标准基因，其特征在于，条形码标准基因序列SEQIDNO.1:

TCTTGTTCTTAGTGGAGCGAGGATCGGTTCAACGAAATTGTTAAGGAAACATCTACTTTCATCAAAAAGGTCGGATACAACCCCAAGGCCGTCGCTTTCGTTCCCATCTCTGGCTGGCACGGTGACAACATGTTGGAGGAATCTACCAAGTAAGTCTTTAATGGCYGAGCCATATCATGGTTTTGATAATCGCTATCTTAGCATGTCATGGTTCAAGGGCTGGACCAAGGAGACGAAGGCCGGTGTTGTCAAGGGCAAGACCCTTCTMGATGCTATTGACGCCATTGAACCCCCTGTGCGTCCTTCCGACAAGCCCCTCCGTCTTCCCCTTCAGGATGTCTACAAAATCGGTGGTATCGGTACTGTCCCTGTCGGTCGTGTTGAAACCGGTATCATCAAGGCCGGCATGATTGTCACTTTCGCCCCTTCAAATGTCACCACTGAAGTCAAGTCGGTCGAAATGCACCACGAGCAGCTTGAGCAAGGAACCCCTGGTGATAACGTCGGTTTCAACGTCAAGTATGTGTACTTTCCGTTCCCCTTCACCGAATCTCACTTTGTGTCAGAAACGTCTCCGTCAAGGATATTCGTCGTGGTAATGTCGCCTCCGATTCGAAGAACGACCCCTGC。

2.一种应用权利要求1所述的标准基因进行毒沟褶菌分子鉴定的方法，其特征在于，包括以下4个步骤：

(1)从样品组织中提取基因组DNA；

(2)以步骤(1)所提取的基因组DNA为模板，用毒沟褶菌TEF特异性引物，进行聚合酶链式反应；

(3)对步骤(2)扩增得到的DNA产物进行测序；

(4)将测序结果与基因序列SEQIDNO.1的进行同源性比对，若同源性在99％以上，即可将该样品鉴定为毒沟褶菌(T.venenata)。

3.根据权利要求2所述的一种应用标准基因进行毒沟褶菌分子鉴定的方法，其特征在于，所述TEF特异性引物的引物序列为：

正向引物TEF-630F:5'CTTGTTCTAGTGGAGCGAGGAT3'；

反向引物TEF-630R:5'TTGGCAGGGTCGTTCTTC3'。

4.根据权利要求2所述的一种标准基因进行毒沟褶菌分子鉴定的方法，其特征在于，聚合酶链式反应中，其扩增条件为95℃预变性3min，接下来94℃变性30s，50℃退火1min，72℃延伸1.5min，一共进行30-35个循环，最后72℃延伸10min。

5.根据权利要求2所述的标准基因进行毒沟褶菌分子鉴定的方法，其特征在于，所述DNA产物的长度为630bp。