[发明专利]一种具有抗肿瘤活性的龙葵精制多糖的提取纯化方法有效

专利信息
申请号: 201510534404.3 申请日: 2015-08-27
公开(公告)号: CN105111323B 公开(公告)日: 2017-09-29
发明(设计)人: 黄越燕;朱琦峰 申请(专利权)人: 嘉兴学院
主分类号: C08B37/00 分类号: C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00
代理公司: 杭州千克知识产权代理有限公司33246 代理人: 黎双华
地址: 314001 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 具有 肿瘤 活性 精制 多糖 提取 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种具有抗肿瘤活性的龙葵精制多糖的提取纯化方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)龙葵粗多糖样品的制备:

龙葵饮片40-60℃干燥6-8h后,粉碎过40目筛,制得龙葵粉末;将龙葵粉末加入4-5重量倍石油醚,于50-55℃水浴条件下,加热回流脱脂2次,每次2h,过滤去液留渣;将药渣加入2倍重量的80%乙醇,于80℃水浴条件下加热回流2次,每次1h,过滤去液留渣,药渣晾干,制成已脱脂的龙葵粉末;将上述已脱脂的龙葵粉末置于闪式提取仪的容器中,加蒸馏水30重量倍,以80V电压闪式提取2次,每次2min;合并提取液,纱布过滤,以3000r/min离心15min,取上清液减压浓缩至50%药材体积,在搅拌下加入乙醇调节含醇量至80%,2-6℃静置冷藏12-24h,减压抽滤,沉淀用无水乙醇、乙醚依次洗涤2-3次后,60℃真空干燥,得龙葵粗多糖;

(2)龙葵精制多糖的纯化:

将步骤(1)所得的龙葵粗多糖用蒸馏水溶解配成质量浓度为1%的溶液,用3%-5%三氯乙酸溶液缓缓调节pH至2.5-3.0,振荡处理20min,2-6℃静置2-4h,以3000r/min离心10min去除胶状蛋白沉淀;在上清液中加入活性炭,以稀HCl调节pH至5,40℃保温脱色20min,静置1h后,以4000rpm/min离心20min除去沉淀;将上清液加入4倍量的95%乙醇沉淀,2-6℃静置冷藏12-24h,以4000rpm/min离心收集沉淀,用无水乙醇、乙醚依次洗涤2-3次后,60℃真空干燥得龙葵精制多糖。

2.根据权利要求1所述的提取纯化方法,其特征在于:步骤(2)中用三氯乙酸溶液调节pH至2.5。

3.根据权利要求1所述的提取纯化方法,其特征在于:步骤(2)中活性炭的加入量为待处理液量的0.7%。

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