[发明专利]一种具有抗肿瘤活性的龙葵精制多糖的提取纯化方法有效
申请号: | 201510534404.3 | 申请日: | 2015-08-27 |
公开(公告)号: | CN105111323B | 公开(公告)日: | 2017-09-29 |
发明(设计)人: | 黄越燕;朱琦峰 | 申请(专利权)人: | 嘉兴学院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00 |
代理公司: | 杭州千克知识产权代理有限公司33246 | 代理人: | 黎双华 |
地址: | 314001 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 肿瘤 活性 精制 多糖 提取 纯化 方法 | ||
1.一种具有抗肿瘤活性的龙葵精制多糖的提取纯化方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)龙葵粗多糖样品的制备:
龙葵饮片40-60℃干燥6-8h后,粉碎过40目筛,制得龙葵粉末;将龙葵粉末加入4-5重量倍石油醚,于50-55℃水浴条件下,加热回流脱脂2次,每次2h,过滤去液留渣;将药渣加入2倍重量的80%乙醇,于80℃水浴条件下加热回流2次,每次1h,过滤去液留渣,药渣晾干,制成已脱脂的龙葵粉末;将上述已脱脂的龙葵粉末置于闪式提取仪的容器中,加蒸馏水30重量倍,以80V电压闪式提取2次,每次2min;合并提取液,纱布过滤,以3000r/min离心15min,取上清液减压浓缩至50%药材体积,在搅拌下加入乙醇调节含醇量至80%,2-6℃静置冷藏12-24h,减压抽滤,沉淀用无水乙醇、乙醚依次洗涤2-3次后,60℃真空干燥,得龙葵粗多糖;
(2)龙葵精制多糖的纯化:
将步骤(1)所得的龙葵粗多糖用蒸馏水溶解配成质量浓度为1%的溶液,用3%-5%三氯乙酸溶液缓缓调节pH至2.5-3.0,振荡处理20min,2-6℃静置2-4h,以3000r/min离心10min去除胶状蛋白沉淀;在上清液中加入活性炭,以稀HCl调节pH至5,40℃保温脱色20min,静置1h后,以4000rpm/min离心20min除去沉淀;将上清液加入4倍量的95%乙醇沉淀,2-6℃静置冷藏12-24h,以4000rpm/min离心收集沉淀,用无水乙醇、乙醚依次洗涤2-3次后,60℃真空干燥得龙葵精制多糖。
2.根据权利要求1所述的提取纯化方法,其特征在于:步骤(2)中用三氯乙酸溶液调节pH至2.5。
3.根据权利要求1所述的提取纯化方法,其特征在于:步骤(2)中活性炭的加入量为待处理液量的0.7%。
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