[发明专利]一种以橘皮渣为原料的高蛋白饲料的生产方法及饲料

权利要求书

1.一种以橘皮渣为原料的高蛋白饲料的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）混料：将橘皮渣、小麦麸、尿素按质量比100~106:20~22:1.21混合成发酵基质，所述的橘皮渣为柑橘工业榨汁后未经脱水处理的橘皮渣；所述的小麦麸为粉碎后，过20~40目筛的筛下物；

2）一段发酵：向步骤1）制成的发酵基质中按质量比10：3~4接种甲发酵菌液，形成含水率为63.56~67.80%的一段发酵料，并使其在35~40℃下发酵66h~72h制成一段发酵饲料；每隔8小时搅拌一次上述一段发酵料，每次搅拌时间 23min-25min；所述的甲发酵菌液的溶质为体积比1：1的米曲霉和康宁木霉及不可去除的杂质；

3）二段发酵：向步骤2）制成的一段发酵饲料按质量比5：1.9~2接种乙发酵菌液，形成含水率为57.30~59.23%的二段发酵料，并使其在34~38℃下发酵65h-72h制成高蛋白饲料；每隔8小时搅拌一次上述二段发酵料，每次搅拌时间 25min~30min；所述的乙发酵菌液的溶质为体积比3 ：1 的热带假丝酵母和球拟圆酵母及不可去除的杂质；

所述的甲发酵菌液的制备方法包括以下步骤：

（Ⅰ）斜面菌种培养：马铃薯琼脂培养基即 PDA 固体培养基，将米曲霉和康宁木霉分别在该琼脂培养基上接种，置于培养箱中，30℃培养 24h ；

（Ⅱ）一级种子试管培养：分别在装有100mL液体培养基的250mL三角瓶中接种步骤（Ⅰ）培养的菌株2环，30℃，180rpm，培养 48 h，分别形成米曲霉菌液和康宁木霉菌液；所述的液体培养基为马铃薯液体培养基即 PDA 液体培养基 ；

（Ⅲ）二级种子摇瓶培养：将步骤（Ⅱ）培养的菌液分别以液体培养基体积的5%的接种量接种到装有100 mLPDA液体培养基的250 ml三角瓶中，30℃，180 rpm，培养48 h，形成分别形成米曲霉培养液和康宁木霉培养液 ；

（Ⅳ）混合种子摇瓶培养:将步骤（Ⅲ）中米曲霉和康宁木霉培养液按体积比1:1接种到装有100mLPDA 液体培养基的250ml三角瓶中，总接入量为PDA液体培养基体积的5%，30℃、180 rpm培养48h，得到活菌数为 6.8×10⁹~7.5×10⁹ CFU/mL 的甲发酵菌液；

所述的乙发酵菌液的制备方法包括以下步骤 ：

①斜面菌种培养：将含糖量为5°Bix的麦芽汁琼脂培养基置于pH=7、温度为121℃、压力为0.1Mpa下灭菌30min，将热带假丝酵母和球拟圆酵母分别在该琼脂培养基上接种，置于培养箱中，30℃培养24h；

②一级种子试管培养：分别在装有100mL液体培养基的250mL三角瓶中接种步骤①培养的菌株2环，30℃，180 rpm，培养48h，分别形成热带假丝酵母菌液和球拟圆酵母菌液 ；所述的液体培养基为马铃薯液体培养基即 PDA 液体培养基 ；

③二级种子摇瓶培养：将步骤②培养的菌液分别以液体培养基体积的5%的接种量接种到装有100 mLPDA液体培养基的250 ml三角瓶中，30℃、180 rpm培养48 h，分别形成热带假丝酵母培养液和球拟圆酵母培养液 ；

④混合种子摇瓶培养:将步骤③中热带假丝酵母和球拟圆酵母培养液按体积比3:1接种到装有100mLPDA 液体培养基的250ml三角瓶中，总接入量为PDA液体培养基体积的5%，30℃、180rpm培养48h，得到活菌数为6.0×10⁹~6.3×10⁹ CFU/mL的乙发酵菌液。

2.一种以橘皮渣为原料的高蛋白饲料，其特征在于，使用权利要求1所述的方法生产，其中各成分的质量百分数为粗蛋白 50.24%~51.13%、粗脂肪 2.52%~2.64%、粗纤维 3.33%~3.45%、粗灰分 5.20%~5.53%、钙 0.75%~0.76%、果胶 4.74%~4.86%、总磷0.81%~0.84%、氯化钠 0.46%~0.51%、含水率 13.04%~13.61%。