[发明专利]一株假单胞菌属解磷细菌Y2及其制备的生物有机肥和应用

说明书

技术领域

本发明属于农业微生物领域，提供一株假单胞菌属高效解磷细菌Y2及其研制的生物有机肥。

背景技术

磷是植物生长必不可少的营养元素，我国耕地缺磷现象普遍，土壤中无效磷形态占到95％，植物几乎不能直接吸收利用。土壤中难溶性磷可分为有机磷和无机磷，其中难溶性有机磷占土壤全磷的20％‐50％。过磷酸钙等磷肥的有效磷含量偏低，而且施用后磷肥当季利用率为5％‐25％，剩余大部分磷与土壤中的Ca²⁺、Fe³⁺以及Al³⁺等结合形成难溶性磷酸盐，因此，如何提高磷利用率是一个急需解决的问题。植物根际的解磷菌数量不足以和其他微生物竞争，难以发挥其活性。固氮、解磷、解钾菌株是微生物肥料的主要菌株，因此，有必要从植物根际自然条件下筛选高效解磷菌株，制成微生物肥料回接到土壤中，确保该类微生物能够有效定殖于植物根际，以促进植物生长。一些研究者提出一个方案：通过开发高效解磷微生物肥料，减少化学肥料的使用来提高土壤中有效磷的含量。同时，一些研究者经过试验证实解磷菌与有机肥料在一起能发挥更好的解磷作用。因此，本发明正好把二者很好地结合起来。

生物有机肥是指特定功能微生物与主要以动植物残体(如畜禽粪便、农作物秸秆等)为来源并经无害化处理、腐熟的有机物料复合而成的一类兼具微生物肥料和有机肥效应的肥料。其本质特征是含有特定功能的、表现出一定肥料效应的微生物，这些功能微生物的生命活动是生物有机肥优于其它肥料的关键因素。生物有机肥发挥作用的关键在于肥料中有益微生物的数量，因此研究不同的配方和二次固体发酵工艺确保肥料中活菌数达到最高变得尤为重要。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一株假单胞菌属解磷细菌Y2及其应用。

本发明的另一目的是提供该细菌制备的生物有机肥及其应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

一株假单胞菌属细菌(Pseudomonas sp.)Y2，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2014年12月25日，保藏编号为CGMCC NO.10242。

菌株Y2在LB平板上的菌落为淡黄色圆形，表面光滑湿润，边缘整齐，具有一定的黏性，易挑起。在显微镜下所观察到的营养体细胞，革兰氏染色阴性，菌体着色均匀，呈杆状。酪氨酸水解反应，酪素水解反应，氧化酶反应，接触酶反应，果糖利用，利用柠檬酸盐反应，从甘油产二羟丙酮反应均呈阳性，甲基红反应，V.P反应，明胶液化反应，赖氨酸脱羧基反应呈阴性10％NaCl生长。菌株16S rDNA序列构建的系统发育树见图1。菌株Y2位于Pseudomonas sp.分支上，结合生理生化试验将Y2鉴定为假单胞菌属细菌。

本发明所述的假单胞菌属细菌Y2在溶解土壤中难溶性磷和/或促进植物生长中的应用。

本发明所述的假单胞菌属细菌Y2在制备溶解土壤中难溶性磷和/或促进植物生长的生物有机肥中的应用。

由本发明所述的假单胞菌属细菌Y2制备的解磷促生生物有机肥。。

一种制备所述的生物有机肥的生产方法，将质量比40％菜粕(干重)和60％的腐熟鸡粪(干重)堆肥进行均匀混合，将假单胞菌属细菌Y2发酵液接入上述混合物中进行固体发酵，每吨混合物中加入Y2菌株发酵液50L，固体发酵过程中每天翻堆1次，使固体发酵温度不超过50℃，发酵5‐7天后结束，Y2菌株含量可达到1×10⁸CFU/g(肥料干重)以上；将上述发酵好的生物有机肥在自然条件下将含水量风干至30％以下，得为粉状生物肥料；或者最后在温度不超过60℃的条件下将上述发酵好的生物有机肥用造粒机进行造粒，造粒结束后进行适当风干，让肥料含水量降至25～32％，得粒状生物有机肥料。

所述的生产方中所述的Y2发酵液通过以下方法制备：将保藏号为CGMCC NO10242的假单胞菌Y2接种到LB培养液中，进行液体发酵生产，发酵生产的条件为：pH值自然，发酵温度范围30～35℃，搅拌速度为170～200转/分钟，发酵时间为40h，使发酵液中含菌量≥1×10¹⁰个/mL。

所述的生产方法中所用腐熟后的鸡粪堆肥其发芽指数为98％以上，有机质质量比含量≥45％，有机氮质量比含量为2‐3％，含水量质量比为25‐30％。

所述促生生物有机肥料中Y2活菌数≥1×10⁸CFU/g(肥料干重)，全氮含量为2.5‐3.5％，总氮磷钾养分为6‐8％、有机质含量≥40％。