[发明专利]用于筛查脊髓性肌萎缩症致病基因携带者的试剂盒及应用

权利要求书

1.一种用于筛查脊髓性肌萎缩症致病基因携带者的试剂盒，其特征在于包括：

以SMN1基因exon7为检测对象而设计的PCR扩增引物和第一Taqman探针，

以及，PCR反应试剂，包括聚合酶及缓冲溶液；

其中，所述PCR扩增引物具有：

SEQIDNo.1、SEQIDNo.2所示序列，

或者，相对于SEQIDNo.1、SEQIDNo.2的核酸序列有一个碱基缺失、替代或插入且保留与SEQIDNo.1、SEQIDNo.2相同生物活性的核酸序列；

所述第一Taqman探针具有：

SEQIDNo.3所示序列；

或者，相对于SEQIDNo.3的核酸序列有一个碱基缺失、替代或插入且保留与SEQIDNo.3相同生物活性的核酸序列。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于还包括以ALB基因exon12为检测对象而设计的内参引物和第二Taqman探针，所述内参引物具有SEQIDNo.4、SEQIDNo.5所示序列，所述第二Taqman探针具有SEQIDNo.6所示序列。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述第一Taqman探针的至少一端还连接有荧光基团。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于所述第一Taqman探针一端连接有荧光基团，另一端连接有淬灭基团。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于所述第二Taqman探针的至少一端还连接有荧光基团。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于所述第二Taqman探针一端连接有荧光基团，另一端连接有淬灭基团。

7.根据权利要求4或6所述的试剂盒，其特征在于所述荧光基团包括FAM、TET或VIC，所述淬灭基团包括MGBNFQ。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的试剂盒，其特征在于所述PCR反应试剂包括TaqMan通用PCR扩增预混试剂。

9.一种采用权利要求1-8中任一项所述的试剂盒筛查脊髓性肌萎缩症致病基因携带者的PCR扩增方法，其特征在于包括：

将受检样本与所述SMN1基因exon7和内参ALB基因exon12的PCR扩增引物、第一Taqman探针、第二Taqman探针PCR反应试剂混合形成PCR反应体系，

进行PCR扩增反应，包括：

变性反应，条件包括：温度为95℃-97℃，时间为5min-10min；

PCR循环扩增反应，条件包括：退火和延伸温度为58℃-61℃，40个循环；

以及，检测SMN1基因exon7拷贝数，从而判别所述基因样本是否来源于脊髓性肌萎缩症基因携带者。

10.根据权利要求9所述的PCR扩增方法，其特征在于：当SMN1基因exon7拷贝数为2时，受检样本为非脊髓性肌萎缩症致病基因携带者，拷贝数为1时，受检样本为脊髓性肌萎缩症致病基因携带者，拷贝数为0时，为脊髓性肌萎缩症患者；拷贝数为3时，受检样本为非脊髓性肌萎缩症致病基因携带者。